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高效液相色谱基线不稳问题
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用60比40的甲醇水做流动相，用乙酸调PH为3.2，紫外检测器，为什么基线总是走不稳？谢谢各位了，，,. [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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【答案】应助回帖
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crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-11-05 19:28:42
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可能存在以下原因: 1、柱温波动。（即使是很小的温度变化 都会引起基线的波动。通常影响示差检测 器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测 器或其它光电类检测器。） 1、控制好柱 子和流动相的温度，在检测器之前使用热 交换器图 2、流动相不均匀。（流动相条件变化引 起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2 、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添 加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中 使用氦气。 3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或 其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要， 可以用1N的硝酸。（不要用盐酸） 4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池 窗口破裂，产生噪音基线） 4、取出阻塞 物或更换管子。参考检测器手册更换流通 池窗。 5、流动相配比不当或流速变化 5、更改 配比或流速。为避免这个问题可定期检查 流动相组成及流速。 6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流 动相时，在分析前用10-20倍体积的新流 动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配 成 7、检查流动相的组成。使用高品质的 化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质（高K 值）以 馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步 升高的基线。 8、使用保护柱，如有必要 ，在进样之间或在分析过程中，定期用强 溶剂冲洗柱子。 9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 9 、重新设定基线。当检测器动力学范围发 生变化时，使用新的流动相。 10、检测器没有设定在最大吸收波长处，将波长调整至最大吸收波长处 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
7楼2013-11-05 15:18:22
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