应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞pull down实验，蛋白电泳上了三个样，只有第一个出现，怎么才能让后两个出现呢？
31/1返回列表
查看: 940  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

浩子jerry

金虫 (正式写手)

(ˇˍˇ） 想～

[求助] 细胞pull down实验，蛋白电泳上了三个样，只有第一个出现，怎么才能让后两个出现呢？

小弟在做细胞的pull down实验，提取了3次蛋白，跑电泳，然后考染，第一次出来了，后两次木有，而且阴性对照也没出现，是pull down 时候没提出来么？做pull down 时候要注意哪些啊？请各位大侠多多指教啊
细胞pull down实验，蛋白电泳上了三个样，只有第一个出现，怎么才能让后两个出现呢？
20131025考染胶.gif


细胞pull down实验，蛋白电泳上了三个样，只有第一个出现，怎么才能让后两个出现呢？-1
20131101-2.gif
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
嘎嘎
1楼 2013-11-04 18:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

昙花巫婆

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:51:48
浩子jerry: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-11-05 18:38:53
你可以增加上样量试一下，还有就是你可以用western bolt做一下，有可能是因为蛋白量太少，染色不行，但是做western的化蛋白量很少抗体也能检测到。
做PULL DOWN应该注意的主要就是两个蛋白的结合时间，不要过短，过短的化结合的不彻底，也不要太长，太长的话越容易降解。
暂时就想到这么多，希望对你的实验有帮助。
赞一下 回复此楼
我是女博士，但我并不可怕！
2楼2013-11-04 21:16:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浩子jerry

金虫 (正式写手)

(ˇˍˇ） 想～
引用回帖:
2楼: Originally posted by 昙花巫婆 at 2013-11-04 21:16:34
你可以增加上样量试一下，还有就是你可以用western bolt做一下，有可能是因为蛋白量太少，染色不行，但是做western的化蛋白量很少抗体也能检测到。
做PULL DOWN应该注意的主要就是两个蛋白的结合时间，不要过短，过 ...

嗯，好的 ，谢谢，今天就做了western，晚上压片子
我的后两个不明显，可能降解了，我下次准备测个蛋白浓度试试，估计可以看出来，谢谢
赞一下 回复此楼
嘎嘎
3楼2013-11-05 18:37:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 浩子jerry 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭