24小时热门版块排行榜    

查看: 1237  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

飘逸的云

新虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母相关问题 已有1人参与

本人在毕赤酵母中做异源表达,用的载体是ppic9k,重组菌构建好之后表达一直没有测到酶活,胞内也没有,胞外基本看不到蛋白条带,请问有没有人遇到过类似的情况,如何解决?我现在挑选的是甲醇利用快型的,换慢型的不知道会不会有变化?
因为实验室只有这一个载体,想问一下各位虫友有没有别的载体,能否赠送或者交换一点?跪谢了!(现有的酵母有GS115和KM 71)
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘逸的云

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2013-11-04 15:31:43
你可以试试pPIC3.5K载体
表达出来可能活性不如9k的好

你用过这个载体吗?我要的是分泌的,3.5k貌似是不分泌的吧?能否在这个载体上加上目的基因的信号肽让它分泌呢
3楼2013-11-04 16:19:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飘逸的云: 金币+2, 有帮助 2013-11-04 16:20:09
你可以试试pPIC3.5K载体
表达出来可能活性不如9k的好
2楼2013-11-04 15:31:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飘逸的云: 金币+3, 有帮助 2013-11-05 08:38:26
可以尝试用pPICZαA,可以尝试用发酵罐做,这样可以提高表达量
爱拼才会赢
4楼2013-11-04 21:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
飘逸的云: 金币+3, 谢谢指点,我先看看尝试一下 2013-11-05 08:38:57
引用回帖:
3楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2013-11-04 16:19:53
你用过这个载体吗?我要的是分泌的,3.5k貌似是不分泌的吧?能否在这个载体上加上目的基因的信号肽让它分泌呢...

你分泌型都表达不出来,
你用非分泌型先把它表达出来,
再考虑是否分泌的问题
5楼2013-11-05 08:17:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 材料专硕274一志愿陕西师范大学求调剂 +8 薛云鹏 2026-03-13 8/400 2026-03-19 15:36 by haoshis
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:07 by peike
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 0703化学调剂 +8 妮妮ninicgb 2026-03-15 12/600 2026-03-19 05:55 by anny19840123
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 211本,11408一志愿中科院277分,曾在中科院自动化所实习 +6 Losir 2026-03-12 7/350 2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 295求调剂 +3 小匕仔汁 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:17 by vgtyfty
信息提示
请填处理意见