24小时热门版块排行榜    

查看: 1495  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

飘逸的云

新虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母相关问题 已有1人参与

本人在毕赤酵母中做异源表达,用的载体是ppic9k,重组菌构建好之后表达一直没有测到酶活,胞内也没有,胞外基本看不到蛋白条带,请问有没有人遇到过类似的情况,如何解决?我现在挑选的是甲醇利用快型的,换慢型的不知道会不会有变化?
因为实验室只有这一个载体,想问一下各位虫友有没有别的载体,能否赠送或者交换一点?跪谢了!(现有的酵母有GS115和KM 71)
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘逸的云

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2013-11-04 15:31:43
你可以试试pPIC3.5K载体
表达出来可能活性不如9k的好

你用过这个载体吗?我要的是分泌的,3.5k貌似是不分泌的吧?能否在这个载体上加上目的基因的信号肽让它分泌呢
3楼2013-11-04 16:19:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飘逸的云: 金币+2, 有帮助 2013-11-04 16:20:09
你可以试试pPIC3.5K载体
表达出来可能活性不如9k的好
2楼2013-11-04 15:31:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
飘逸的云: 金币+3, 有帮助 2013-11-05 08:38:26
可以尝试用pPICZαA,可以尝试用发酵罐做,这样可以提高表达量
爱拼才会赢
4楼2013-11-04 21:57:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
飘逸的云: 金币+3, 谢谢指点,我先看看尝试一下 2013-11-05 08:38:57
引用回帖:
3楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2013-11-04 16:19:53
你用过这个载体吗?我要的是分泌的,3.5k貌似是不分泌的吧?能否在这个载体上加上目的基因的信号肽让它分泌呢...

你分泌型都表达不出来,
你用非分泌型先把它表达出来,
再考虑是否分泌的问题
5楼2013-11-05 08:17:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见