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小尾鱼笑脸

新虫 (初入文坛)

[交流] 大肠杆菌原核表达蛋白已有3人参与

有没有遇到过这种情况呢?重组质粒转化表达时,有时表达有时没有表达,不稳定,每次表达条件是一样的!是不是因为菌在平板放久了,不稳定呢??板是10月16号做的转化,后面又做了划线挑了单菌落表达没有像上次明显表达!
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zhangyi05

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

2楼2013-11-03 15:05:06
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沙门小rna

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用的是什么质粒?诱导条件呢,表达蛋白的条件十分重要。请详细说明~
应助之星就是我~没错。你没有看错~
3楼2013-11-03 22:06:19
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小尾鱼笑脸

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-03 22:06:19
用的是什么质粒?诱导条件呢,表达蛋白的条件十分重要。请详细说明~

PGEX-4T1,我试过25°和16°1mM,0.5mM0.1mM,有时候表现了,而且25°,1mM表现量最大,但有时候又没有表现了
4楼2013-12-16 19:46:02
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沙门小rna

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小尾鱼笑脸 at 2013-12-16 19:46:02
PGEX-4T1,我试过25°和16°1mM,0.5mM0.1mM,有时候表现了,而且25°,1mM表现量最大,但有时候又没有表现了...

梯度
,10.100.1000这样摸索诱导条件

[ 发自小木虫客户端 ]
应助之星就是我~没错。你没有看错~
5楼2013-12-16 23:50:58
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-12-16 23:50:58
梯度
,10.100.1000这样摸索诱导条件
...

低温诱导可能载体会丢的

[ 发自小木虫客户端 ]
应助之星就是我~没错。你没有看错~
6楼2013-12-16 23:51:31
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

7楼2024-07-10 15:51:12
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