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zxg_4545

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质的HPLC纯度分析 已有2人参与

想用HPLC看看CRP(25KD)的纯度,用C18,大口径的(300A)柱子行吗?蛋白质液相分析前需要做什么处理吗?各位做过蛋白HPLC的大侠给在下指导一下,谢谢!
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zxg_4545

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cpn at 2014-07-21 22:35:54
有加甲酸或TFA么?水相有机相比例多少?
3min应该已经大于柱子的死时间了...

加了TFA的,水相有机相比例从高到低都换过,时间都是在3min左右。后来换了凝胶柱试了下,效果好多了。谢谢!
8楼2014-07-25 15:38:58
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查看全部 9 个回答

e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
以前用agilent extend C8柱做过17.5kd的,处理时注意溶解,离心
悲催的研发!
2楼2013-10-30 16:30:23
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


release53: 金币+1, 感谢应助 2013-10-30 19:02:21
还要注意洗脱强度,有可能用乙腈洗脱能力都有限,当时我们流动相里掺了异丙醇来增强洗脱能力
悲催的研发!
3楼2013-10-30 16:31:32
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liyiran1035

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

需要使用梯度 这样可以减小峰宽 增加分离度
4楼2013-12-31 09:10:29
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