应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 蛋白质的HPLC纯度分析
91/1返回列表
查看: 2724  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zxg_4545

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质的HPLC纯度分析 已有2人参与

想用HPLC看看CRP（25KD）的纯度，用C18，大口径的（300A）柱子行吗？蛋白质液相分析前需要做什么处理吗？各位做过蛋白HPLC的大侠给在下指导一下，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-30 16:13:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前用agilent extend C8柱做过17.5kd的，处理时注意溶解，离心
赞一下 回复此楼
悲催的研发！
2楼2013-10-30 16:30:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
release53: 金币+1, 感谢应助 2013-10-30 19:02:21
还要注意洗脱强度，有可能用乙腈洗脱能力都有限，当时我们流动相里掺了异丙醇来增强洗脱能力
赞一下 回复此楼
悲催的研发！
3楼2013-10-30 16:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyiran1035

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

需要使用梯度 这样可以减小峰宽 增加分离度
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-31 09:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpn

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lz,不要用C18了，蛋白很有可能在柱子上有强保留洗不下来。
用大孔径的C4或C8，流动相加水乙腈TFA，另外提高柱温改善拖尾。
蛋白液相分析前只要除掉颗粒型杂质就行了，可以用PES等低蛋白吸附的滤膜过滤下。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2013-12-31 11:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxg_4545

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cpn at 2013-12-31 11:04:27
lz,不要用C18了，蛋白很有可能在柱子上有强保留洗不下来。
用大孔径的C4或C8，流动相加水乙腈TFA，另外提高柱温改善拖尾。
蛋白液相分析前只要除掉颗粒型杂质就行了，可以用PES等低蛋白吸附的滤膜过滤下。

恩，试过C4和C8的，不管用什么比例的流动相，都在3min左右出峰，感觉在柱子上没有保留啊。
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-18 16:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpn

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zxg_4545 at 2014-07-18 16:24:02
恩，试过C4和C8的，不管用什么比例的流动相，都在3min左右出峰，感觉在柱子上没有保留啊。...

有加甲酸或TFA么？水相有机相比例多少？
3min应该已经大于柱子的死时间了
赞一下 回复此楼
7楼2014-07-21 22:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxg_4545

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cpn at 2014-07-21 22:35:54
有加甲酸或TFA么？水相有机相比例多少？
3min应该已经大于柱子的死时间了...

加了TFA的，水相有机相比例从高到低都换过，时间都是在3min左右。后来换了凝胶柱试了下，效果好多了。谢谢！
赞一下 回复此楼
8楼2014-07-25 15:38:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cpn

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zxg_4545 at 2014-07-25 15:38:58
加了TFA的，水相有机相比例从高到低都换过，时间都是在3min左右。后来换了凝胶柱试了下，效果好多了。谢谢！...

你的蛋白极性得有多大啊。。。
赞一下 回复此楼
9楼2014-07-26 00:16:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zxg_4545 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭