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zxg_4545

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[求助] 蛋白质的HPLC纯度分析已有2人参与

想用HPLC看看CRP（25KD）的纯度，用C18，大口径的（300A）柱子行吗？蛋白质液相分析前需要做什么处理吗？各位做过蛋白HPLC的大侠给在下指导一下，谢谢！

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1楼 2013-10-30 16:13:02

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zxg_4545

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引用回帖:

5楼: Originally posted by cpn at 2013-12-31 11:04:27
lz,不要用C18了，蛋白很有可能在柱子上有强保留洗不下来。
用大孔径的C4或C8，流动相加水乙腈TFA，另外提高柱温改善拖尾。
蛋白液相分析前只要除掉颗粒型杂质就行了，可以用PES等低蛋白吸附的滤膜过滤下。

恩，试过C4和C8的，不管用什么比例的流动相，都在3min左右出峰，感觉在柱子上没有保留啊。