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月殇

木虫 (小有名气)

[求助] dna电泳显影

我是个生物新手,最近在做dna琼脂糖凝胶电泳,想请教下200微米的沟道进行电泳后怎么看他的成像结果?我试了在凝胶成像仪中打开紫外灯看不见亮斑,也看不到沟道。不知道在微米尺度如何观测电泳结果,请多多指教!
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现在流的汗都是当初脑子进的水
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月殇

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xl_dut at 2013-10-14 23:15:32
我也没做过这么小跑道的电泳,可能因为量太小了吧!如果样品量足够的话,建议楼主可以用稍宽孔的胶,并增加上样量。
当然,如果量太少的话,楼主也可以试试分子杂交的办法,即用带荧光标记的DNA单链来与目的片段互 ...

谢谢,我再试试
现在流的汗都是当初脑子进的水
5楼2013-10-15 09:42:37
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xl_dut

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是没有加核酸荧光染料吧!
请问楼主是否用EB进行了染色,或者在配胶的时候加入了goldview之类的?
一日之计在于昨天!
2楼2013-10-14 18:08:00
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月殇

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xl_dut at 2013-10-14 18:08:00
应该是没有加核酸荧光染料吧!
请问楼主是否用EB进行了染色,或者在配胶的时候加入了goldview之类的?

只用eb燃料,就是担心沟道太窄发光看不明显
现在流的汗都是当初脑子进的水
3楼2013-10-14 20:13:11
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xl_dut

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
月殇: 金币+10, 有帮助 2013-10-15 09:41:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by 月殇 at 2013-10-14 20:13:11
只用eb燃料,就是担心沟道太窄发光看不明显...

我也没做过这么小跑道的电泳,可能因为量太小了吧!如果样品量足够的话,建议楼主可以用稍宽孔的胶,并增加上样量。
当然,如果量太少的话,楼主也可以试试分子杂交的办法,即用带荧光标记的DNA单链来与目的片段互补配对、特异性结合,以实现对目的片段的检测。那样的分辨率能高一些。方法可参照southern blot。
一日之计在于昨天!
4楼2013-10-14 23:15:32
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