| 查看: 2831 | 回复: 10 | ||
偶像的黄昏yy铜虫 (小有名气)
|
[求助]
求教关于DTNB！！！ 已有3人参与
|
|
| 测二硫键时，DTNB难溶于水，加热后依然难溶，请问有哪位高手做过这个实验，帮忙教一下 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎调剂滁州学院生物与医药专硕
已经有1人回复
-
086003调剂求助
已经有22人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有57人回复
-
生物与医药调剂名额多，专业范围宽食品生物相关的07，08，09，10都可调
已经有15人回复
-
淮北师范大学生物医药还有11个调剂名额和资源环境还有10调剂名额，欢迎大家赶紧调剂！
已经有0人回复
-
食物营养学 电子版
已经有0人回复
-
电子科技大学（深圳）高等研究院陈明豪课题组招收推免硕士研究生
已经有19人回复
-
金铜纳米合成
已经有0人回复
-
求助1977版中国药典，非常感谢！！！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于面试的几个问题，求教大家了，拜托
已经有13人回复
- 求教 关于高效液相做回收率的问题 谢谢
已经有6人回复
- 关于DTNB的使用
已经有7人回复
- 关于玻璃表面污染问题，求教！
已经有21人回复
- 关于论文字数问题，向大家求教！
已经有8人回复
- 关于Hog运算的理解求教
已经有4人回复
- 求教关于 天津大学学报（英文版） 的投稿情况~~~~(>_<)~~~~
已经有10人回复
- 求教关于复合板轧制的问题
已经有14人回复
- 求教关于液相色谱柱的问题
已经有10人回复
- 求教关于新加坡国立大学留学的问题
已经有22人回复
- 求教关于chemdraw画图的问题--图纸的设置
已经有12人回复
- 求教关于签证被check的问题~
已经有9人回复
- 关于open access期刊求教！
已经有13人回复
- 求教关于活性聚合PDI的计算方法（急急急，全部家当求教）
已经有5人回复
- 关于Response to Reviewers’ Comments，求教！！！
已经有31人回复
- 【求助/交流】请教：为什么我的乙酰胆碱酯酶在400nm处没有紫外吸收？
已经有17人回复
- 求教关于江苏省普通高校研究生科研创新计划
已经有22人回复
- 【求助】求教关于mapinfo作图问题
已经有12人回复
- 求教关于origin方面的一个问题
已经有8人回复
- 【求助】胶体金标记DNA的问题
已经有14人回复
【答案】应助回帖
|
我也要做二硫键和巯基的测定，今天第一次配DTNB，是用ph8 的tris-甘氨酸直接稀释定容的，发现DTNB有少量不溶，请教了下侧过巯基的同学，他们说是把缓冲液的各种所需试剂和DTNB一起溶解溶解到离定容还剩一点体积的时候，再调节ph至8,再转移到容量瓶定容。 然后我就做了个试验，把DTNB溶于少量ph8上述缓冲液，发现pH 下降的蛮厉害的，所以我猜是因为这个原因，我用ph8的tris-甘氨酸缓冲液配dtnb才没完全溶解。 最后，我用适量ph8的tris-甘氨酸缓冲液悬浮DTNB，再用氢氧化钠调节pH至8，最后用ph8的tris-甘氨酸缓冲液定容。 第一次配这个，好辛酸哦~文献里都不写细节，让人走好多弯路，希望我的经验在你那也适用~ |
6楼2014-04-26 21:38:47
煜，莫烦恼
木虫 (著名写手)
虫蛹
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 13489.7
- 散金: 22
- 红花: 7
- 帖子: 1133
- 在线: 267小时
- 虫号: 966097
- 注册: 2010-03-09
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
3楼2013-10-14 14:37:26
7楼2014-04-26 21:40:11
user59888
金虫 (文坛精英)
宫创始人 ------小妮
- 食品EPI: 15
- 应助: 461 (硕士)
- 贵宾: 0.463
- 金币: 1224.2
- 散金: 38093
- 红花: 1140
- 沙发: 950
- 帖子: 40334
- 在线: 1737.1小时
- 虫号: 1737174
- 注册: 2012-04-05
- 专业: 食品加工技术
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=5080927&fpage=1 我不是很懂，但是里面很多人都做过，应该懂，建议联系他们，耐心请教 |
2楼2013-10-14 11:24:29
祸不单行1246
银虫 (初入文坛)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 335.7
- 帖子: 36
- 在线: 26.2小时
- 虫号: 1622877
- 注册: 2012-02-17
- 性别: GG
- 专业: 食品加工学基础
4楼2013-10-14 15:34:17
hbtmsw
木虫 (小有名气)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 2744.9
- 散金: 27
- 红花: 4
- 帖子: 121
- 在线: 115.1小时
- 虫号: 1115705
- 注册: 2010-10-07
- 专业: 微生物遗传育种学
5楼2014-04-18 20:46:11
8楼2015-09-25 14:44:47
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 谢谢了  |
9楼2015-09-25 20:42:47
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 |
10楼2015-09-25 20:43:08
