| 查看: 3432 | 回复: 7 | |||
[求助]
关于DTNB的使用
|
|
本人正在做酶的巯基含量测定，查了很多文献都是用DTNB对酶巯基数目进行测定，发现几个问题： 1、原先是用pH6.8的缓冲液配制的DTNB与脲酶进行反应，结果在412nm处不显颜色。2、改在pH8的缓冲液中脲酶与DTNB进行反应，发现随着DTNB的浓度越高，反应液显色越深，但是本底（脲酶的配制溶液+DTNB液）也基本显示一样的颜色。 3、怀疑DTNB在pH8的液体中会显色，所以直接把DTNB调至pH=8，也显示一样的颜色。 4、之前也有用过半胱氨酸和DTNB在pH6.8的时候进行反应，结果马上显色，在412nm处有很高的吸光度。 想问一下各位，DTNB的使用pH有没有什么特殊的要求，是不是在pH8或者某个pH值下会有显色呢？还有，脲酶算不算巯基丰富的酶，我查了很多文献，基本上人家测脲酶中的巯基都是用DTNB的，求解答，谢谢  [ Last edited by Mr泡面 on 2012-10-19 at 17:01 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 乙酰胆碱酯酶 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有187人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于易错PCR所使用的各项原料
已经有4人回复
- 关于硅胶板的使用调查
已经有43人回复
- 关于手性柱的使用
已经有6人回复
- 关于自然基金经费使用
已经有4人回复
- 关于醋酸锌的使用
已经有4人回复
- 关于日本aist网站使用
已经有6人回复
- 大家交流一下关于EP管的使用，有哪些问题和需要注意的？
已经有8人回复
- 关于linux系统下使用UDF的问题
已经有7人回复
- 关于硬脂酸钠的使用PH范围
已经有5人回复
- 【整理】今天整理硬盘上的资料，偶然发现的好玩的小东西就直接发上来吧
已经有105人回复
- 关于国外购买书籍使用经费报销问题的答疑
已经有9人回复
- 【求助/交流】乙酰胆碱酯酶测定方法（标线如何做）？？ 谢谢诶！
已经有5人回复
2楼2012-10-19 22:11:54
3楼2012-10-20 05:00:25
4楼2012-10-20 09:15:25
5楼2012-10-20 12:17:13
| 顶 |
6楼2012-10-20 18:27:15
|
你看看文献一般DTNB加多少？一般可能20倍蛋白的量就好，你的buffer pH是多少啊？你可以单扫一下DTNB，然后扫一下DTNB加蛋白，我觉得你有可能DTNB量太高了，给你发一篇文献，你看看，http://www.jbc.org/content/276/36/33588.full |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
Mr泡面7楼2012-10-21 04:51:51
8楼2012-10-21 09:41:34
