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偶像的黄昏yy

铜虫 (小有名气)

应助: 12 (小学生)
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专业: 食品科学基础

[求助] 求教关于DTNB！！！已有3人参与

测二硫键时，DTNB难溶于水，加热后依然难溶，请问有哪位高手做过这个实验，帮忙教一下

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耶和华是我的牧者，我必不至于缺乏

1楼 2013-10-14 11:16:44

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钢琴兔

银虫 (小有名气)

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专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

我也要做二硫键和巯基的测定，今天第一次配DTNB，是用ph8 的tris-甘氨酸直接稀释定容的，发现DTNB有少量不溶，请教了下侧过巯基的同学，他们说是把缓冲液的各种所需试剂和DTNB一起溶解溶解到离定容还剩一点体积的时候，再调节ph至8,再转移到容量瓶定容。然后我就做了个试验，把DTNB溶于少量ph8上述缓冲液，发现pH 下降的蛮厉害的，所以我猜是因为这个原因，我用ph8的tris-甘氨酸缓冲液配dtnb才没完全溶解。
最后，我用适量ph8的tris-甘氨酸缓冲液悬浮DTNB，再用氢氧化钠调节pH至8，最后用ph8的tris-甘氨酸缓冲液定容。
第一次配这个，好辛酸哦~文献里都不写细节，让人走好多弯路，希望我的经验在你那也适用~