| 查看: 374 | 回复: 2 | |||
[求助]
能否用降落PCR来进行半定量实验
|
|
我是新手，最近在做半定量PCR 如图，三个基因的退火温度都是用梯度PCR选出来的退火温度，温度确定的条件是目的产物扩增效率最高，相对引物二聚体来说较亮。 10-11是11号做出来的图片，从上到下分别对应G,P,C三个基因。从左到右每一个孔依次增加两个循环。循环数为17,19,21,23,25,27,29,31,33,35,37,39,41,43,45 10-12是今天做出来的图，这张图下边倒数第二带亮亮的，这是加样孔（不知为何加样孔如此亮）。从上到下依旧是G,P,C三个基因。同11号相比，所加入的模板浓度和体积都没有变化，引物浓度降为11号引物浓度的一半。1,2孔为一个循环数，3,4孔为一个循环数，依次类推，共6个循环数。从左到右，依次增加三个循环。循环数为29,32,35,38,41,44 所得的结果都不好。我是不是该换引物了。引物直接从外文文献里找，或者我能否用降落PCR来进行半定量PCR实验。求高手指导。  10-11.JPG  10-12.JPG [ Last edited by 月亮先生 on 2013-10-12 at 22:49 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有71人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做荧光定量PCR,如果对照组的目的基因不表达,在采用2-△△Ct时怎么处理数据
已经有6人回复
- 定量pcr实验流程与注意事项
已经有152人回复
- 半定量PCR的一个问题
已经有4人回复
- 荧光定量PCR对链霉菌内目的基因的相对定量，内参应该用什么呢？？
已经有3人回复
- 荧光定量PCR与巢式PCR能结合吗？主要怕扩增出同源基因。
已经有4人回复
- 使用多对引物进行实时定量PCR后未得到实验结果，是否能说明目的基因不表达？
已经有10人回复
- 半定量RT-PCR与实时定量PCR的研究对象
已经有5人回复
- 荧光定量PCR实验技术
已经有15人回复
- 降落PCR一直 跑不出来（用于DGGE）
已经有16人回复
- 实时定量PCR,一定要做标准曲线么?有什么作用?
已经有7人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于做荧光定量pcr的模板问题
已经有12人回复
- 半定量PCR的详细步骤
已经有7人回复
2楼2013-10-13 10:18:40
3楼2013-10-13 20:16:10