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倒骑毛驴

铁虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌BL21包涵体 表达

1.发酵培养基:磷酸氢二钾(3.5g/L);磷酸二氢钾(5g/L);硫酸镁(0.5g/L);硫酸铵(3.5g/L);Yeast extract (5g/L);葡萄糖(5g/L);泡敌(1ml/L);121℃下灭菌 20 min, 冷却到室温后加入氨苄青霉素(200μg/ml)
2.补料液:蛋白胨(10%);酵母提取物(5%);硫酸镁(0.5%);甘油(20%)
3.30℃摇瓶过夜制备种子,1%接种量,溶氧控制在30%~40%,用25%浓氨水维持在6.7左右,30℃培养5小时后开始流加补料液,平均速度约为每升发酵液每小时流加10ml补料液,15小时后40℃诱导4小时后放罐,诱导OD31,下罐OD57,湿重324g

均质机与超声破碎离心后均呈白色沙状,未见传说中的灰白色颗粒
求大神解答
大肠杆菌BL21包涵体 表达
发酵罐破碎 白色


大肠杆菌BL21包涵体 表达-1
摇瓶破碎 灰白色包涵体


大肠杆菌BL21包涵体 表达-2
摇瓶破碎
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寻找idea的孩子
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-10-11 19:23:01
我以前也碰到过,跑电泳没有东西。加点稀盐酸,白砂就溶解了。当时我们估计是镁盐沉淀,就没管它。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
2楼2013-10-11 15:24:42
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倒骑毛驴

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-10-11 15:24:42
我以前也碰到过,跑电泳没有东西。加点稀盐酸,白砂就溶解了。当时我们估计是镁盐沉淀,就没管它。

后来怎么处理的 可否交个朋友
寻找idea的孩子
3楼2013-10-12 09:12:31
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-字仲康

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2016-04-24 23:48:42
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