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毕赤酵母求助帖
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请问有没有做毕赤酵母的大侠啊，新手有几个问题请教。本人现在在做GS115，用的载体是ppic9k，线性化用的是Sac Ⅰ，按理说转化子应该是甲醇利用快型，但是为啥感觉我的转化子却是慢型的？甲醇利用快型是不是在MM培养基中长得比在MD培养基中的更快？转化后涂了RDB平板，然后再挑到了MM和MD平板上，这样做有必要吗？MM平板盖上是否需要加甲醇呢？非常希望能得到各位前辈的指点，跪谢！（图中左边是MD培养基，右边是MM培养基） IMG_20131008_103345.jpg |
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【答案】应助回帖
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kx444555: 金币+4, 鼓励交流 2013-10-08 16:01:00
amisking: 回帖置顶 2013-10-08 18:12:33
飘逸的云: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-09 10:13:17
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MD和MM平板可用来分析HIS+转化子的Mut+及Muts 表型。MD平板是利用营养缺陷筛选，适用于组氨酸合成缺陷型菌株如GS115、KM71等，而MM平板才是用来鉴定甲醇利用快慢的。可以设置GS115 Ablumin(HIS+ Muts)及GS115β-gal HIS+ Mut+，作为Mut+或 Muts 在MD或MM平板上生长的对照。在平板上培养2-3天后，寻找在MD平板正常生长而在MM平板上生长很小或不长的菌（HIS+,Muts）或在MD平板正常生长而在MM平板上也生长正常的菌 株（HIS+,Mut+）。在MM平板上生长正常的菌株即为甲醇利用快型（或称为正常型）。 |
4楼2013-10-08 14:35:21
静安jingan
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2楼2013-10-08 13:16:36
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10楼2013-10-09 10:42:03
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