应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达只能在沉淀中检测出目标蛋白怎么办
51/1返回列表
查看: 4003  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

云中风华

银虫 (小有名气)

[求助] 原核表达只能在沉淀中检测出目标蛋白怎么办

本人老板现在让我师兄做原核表达  目标蛋白68kD(531aa) 用的PET-28a表达载体   做了好久一直只能在37℃用0.4M IPTG条件下诱导出来  并且只能在沉淀中检测出来  但最近37℃沉淀中也检测不到目标蛋白   请各位大神帮忙分析一下可能的原因  顺便介绍下怎样才能让它表达出可溶性的蛋白比如优化条件
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验 细胞生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-06 16:49:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qapollo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
云中风华: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-10-07 21:22:14
目标蛋白是什么物种的？如果你用原核表达真核生物的蛋白基本都是没有活性的，因为原核生物没有分子伴侣不能正确折叠。也许是因为折叠不正确导致蛋白的亲水能力下降才沉淀。你可以试试放到酵母里表达，也许就有可溶性的蛋白表达出来了。
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-06 20:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

sunpeng9907

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-06 18:07:09
云中风华: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-07 21:21:04
N端加信号肽，探索诱导温度及诱导时间。
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-06 17:20:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

John_Chen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待更详细的解答 2013-10-06 18:07:18
云中风华: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-10-07 21:21:22
建议：（1）改变诱导温度和IPTG浓度
（2）换载体，如GST标签的载体
祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
勤能补拙
3楼2013-10-06 17:52:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
云中风华: 金币+1, ★有帮助 2013-10-07 21:22:24
同意三楼的建议，如果还不行，只能进行沉淀的复性操作了。
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-07 08:47:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 cHIDTWCTtLlG 2026-08-19 3/150 2026-08-19 15:28 by rHxJfXUaiknj
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +8 ziyangfang 2026-08-19 9/450 2026-08-19 13:08 by blacksandy
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +8 kkkl_v 2026-08-19 8/400 2026-08-19 12:34 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 115/5750 2026-08-19 12:09 by 医学老男孩
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +8 启萌科技 2026-08-12 30/1500 2026-08-19 10:22 by 启萌科技
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +4 Tide man 2026-08-12 5/250 2026-08-19 07:41 by 201120518022
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +10 yuleib84 2026-08-18 11/550 2026-08-19 07:30 by 羽毛枫f
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭