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herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot湿转的那个三明治怎样操作可以减少气泡?

最近做的WB转出来的膜总是很花的感觉。感觉是三明治在最后夹的时候产生了气泡。而气泡在膜与胶结合后已经确定赶走了。大家有遇到这种情况吗?怎样操作可以解决这个问题呢?
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by DAX1 at 2013-10-01 22:17:49
不是很明白你的意思。什么胶最下方的膜?难道一个夹子不是只放一个膜吗?还是你们的转膜系统我没见过。一直用的是biorad的,好像一个夹子就放一个膜吧。两边个一张厚滤纸。...

我用的也是BIORAD的。是三明治最下方。我一个夹子放4张膜也是转出来过的呀。但是有时就是靠近夹子上方的膜转出来会有气泡的感觉。但是每次最下面的膜都没问题。
7楼2013-10-01 23:11:54
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DAX1

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩。 2013-10-01 21:36:12
如果你都用玻璃棒赶走气泡,应该就不会有啊,不知道你的架子会不会太紧或者太松,这样都不好,太紧考虑找个用很久的海绵,厚度会薄点。松的话多加几张滤纸可能会好点。
2楼2013-10-01 21:31:39
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sylar1022

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-04 00:49:02
膜很花应该不是气泡问题吧…可能是膜或者转膜液,转膜电压电流的问题…用pvdf膜要用甲醇活化一下,电压电流也不要太大,要记得放冰降温

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2013-10-01 21:51:01
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by DAX1 at 2013-10-01 21:31:39
如果你都用玻璃棒赶走气泡,应该就不会有啊,不知道你的架子会不会太紧或者太松,这样都不好,太紧考虑找个用很久的海绵,厚度会薄点。松的话多加几张滤纸可能会好点。

关键就是感觉调整了好像还是没用啊。怀疑不够紧调整过,加过滤纸。每次都是三明治最下方的膜OK。其他的就是丽春红染出来有气泡一类东西在里面的感觉。扫出来的膜也是一样。感觉比较花。。。
4楼2013-10-01 22:07:03
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