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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot湿转的那个三明治怎样操作可以减少气泡？
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot湿转的那个三明治怎样操作可以减少气泡？

最近做的WB转出来的膜总是很花的感觉。感觉是三明治在最后夹的时候产生了气泡。而气泡在膜与胶结合后已经确定赶走了。大家有遇到这种情况吗？怎样操作可以解决这个问题呢？
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1楼 2013-10-01 21:28:45
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sylar1022

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-04 00:49:02
膜很花应该不是气泡问题吧…可能是膜或者转膜液，转膜电压电流的问题…用pvdf膜要用甲醇活化一下，电压电流也不要太大，要记得放冰降温

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3楼2013-10-01 21:51:01
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sylar1022

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by herjasmine at 2013-10-01 22:09:59
应该排除了其他问题了。因为所有的条件以前都摸过。膜也泡过。感觉很大的可能应该是三明治夹的时候的问题。因为每次都是下方OK。上面像有气泡一样的东西。关键就是每次膜放上去时气泡都确认赶走了呀。难道是关夹子 ...

水下操作?…不就直接拿个盘子装上电泳液操作么…

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9楼2013-10-02 07:20:12
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sylar1022

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by herjasmine at 2013-10-02 10:00:36
他们有的实验室有专门的做三明治的水下操作的设备。...

一个夹子几张膜我也试过…毫无问题的啊…膜裁小了放多少都行-_-||

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12楼2013-10-02 18:28:46
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