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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » western blot湿转的那个三明治怎样操作可以减少气泡？
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herjasmine

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot湿转的那个三明治怎样操作可以减少气泡？

最近做的WB转出来的膜总是很花的感觉。感觉是三明治在最后夹的时候产生了气泡。而气泡在膜与胶结合后已经确定赶走了。大家有遇到这种情况吗？怎样操作可以解决这个问题呢？
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1楼 2013-10-01 21:28:45
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DAX1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by herjasmine at 2013-10-01 22:07:03
关键就是感觉调整了好像还是没用啊。怀疑不够紧调整过，加过滤纸。每次都是三明治最下方的膜OK。其他的就是丽春红染出来有气泡一类东西在里面的感觉。扫出来的膜也是一样。感觉比较花。。。...

不是很明白你的意思。什么胶最下方的膜？难道一个夹子不是只放一个膜吗？还是你们的转膜系统我没见过。一直用的是biorad的，好像一个夹子就放一个膜吧。两边个一张厚滤纸。
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6楼2013-10-01 22:17:49
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DAX1

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香分子生物期待你的精彩。 2013-10-01 21:36:12
如果你都用玻璃棒赶走气泡，应该就不会有啊，不知道你的架子会不会太紧或者太松，这样都不好，太紧考虑找个用很久的海绵，厚度会薄点。松的话多加几张滤纸可能会好点。
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2楼2013-10-01 21:31:39
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sylar1022

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-04 00:49:02
膜很花应该不是气泡问题吧…可能是膜或者转膜液，转膜电压电流的问题…用pvdf膜要用甲醇活化一下，电压电流也不要太大，要记得放冰降温

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2013-10-01 21:51:01
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herjasmine

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by DAX1 at 2013-10-01 21:31:39
如果你都用玻璃棒赶走气泡，应该就不会有啊，不知道你的架子会不会太紧或者太松，这样都不好，太紧考虑找个用很久的海绵，厚度会薄点。松的话多加几张滤纸可能会好点。

关键就是感觉调整了好像还是没用啊。怀疑不够紧调整过，加过滤纸。每次都是三明治最下方的膜OK。其他的就是丽春红染出来有气泡一类东西在里面的感觉。扫出来的膜也是一样。感觉比较花。。。
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4楼2013-10-01 22:07:03
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