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中原揽辔

铜虫 (初入文坛)

[求助] 反复冷冻法提取DNA的效果怎么样?

对分离的细菌进行PCR鉴定,直接用活菌液进行PCR效果不太好,请问如果反复煮沸冷冻处理细菌后再进行PCR效果怎么样?有做过的吗?我现在因为做实验时间比较紧张,不想随便试了,请这样做过的小伙伴们指点一下,谢谢各位,拜托了
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肥猫p

木虫 (正式写手)

有些菌确实菌落pcr效果不好。但是想弱弱问下,有反复煮沸冷冻的功夫,干嘛不直接提下基因组?
2楼2013-09-25 23:27:01
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lvshilu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
煮沸5min,或者冻融5次效果都可以,目的就是破壁嘛,或者干脆冻融3次,煮沸5min,搞定!
另外,要离心洗干净培养基,模板量不能太多,也别太少,目测OD600约0.1吧,呵呵,试一试。
需要金币
3楼2013-09-26 18:56:42
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