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普罗旺斯女神

新虫 (初入文坛)

[求助] Western Blot 跑SDS-PAGE出现这样的情况是怎么回事

如图所示，点样时及最开始跑电泳还顺利，后期就这样了，什么原因呢？
Western Blot 跑SDS-PAGE出现这样的情况是怎么回事
IMG_20130916_134122_707.jpg
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1楼 2013-09-16 13:47:51
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因为吃饭

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-16 20:50:06
第一反应应该是胶的问题。。。
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辩证。
2楼2013-09-16 15:53:39
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是胶的问题或者样品的问题。maker跑得正常吗？
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3楼2013-09-16 23:53:08
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MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-17 11:39:46
可能1.溴酚蓝浓度过高 2.电压过低 3.胶太热 带跑一个marker看看
其实最后还是要看染色结果 出现这种情况不一定会最后的结果不好看
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4楼2013-09-17 00:50:52
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普罗旺斯女神

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-16 23:53:08
可能是胶的问题或者样品的问题。maker跑得正常吗？

marker跑的很正常
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5楼2013-09-17 09:57:20
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普罗旺斯女神

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by MaoNaiJi at 2013-09-17 00:50:52
可能1.溴酚蓝浓度过高 2.电压过低 3.胶太热 带跑一个marker看看
其实最后还是要看染色结果 出现这种情况不一定会最后的结果不好看

溴酚蓝是买的，电压是80V跑的，才跑了不到二十分钟就这样了，marker跑的很好，染色背景不是很干净，同样感谢
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6楼2013-09-17 09:59:00
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小小技术官

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-30 17:26:15
有可能是上样量太大，蛋白浓度高
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生活是一面镜子，要笑着面对！
7楼2013-09-17 12:45:58
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hia_25

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-30 17:26:26
槽子没装合适，我遇到过有人出现这样的问题
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8楼2013-09-17 16:53:57
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 普罗旺斯女神 at 2013-09-17 09:57:20
marker跑的很正常...

样品的buffer成分？盐浓度、离子强度大？
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9楼2013-09-17 23:44:22
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MaoNaiJi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-30 17:26:34
您的电压过低了 所以蛋白样品没有压成一条线
我的通常做法 预电泳80V 样品进入分离胶后（大概15-20分钟后）恒压180V
电泳槽外围需要填充冰块
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10楼2013-09-19 00:35:15
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