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qinchen1018

银虫 (初入文坛)

[求助] Western blot

各位大侠，求救啊，本人没跑过SDS-PAGE，实验室之前也没人做过，我的目标蛋白分子量分别是16KD、180KD，marker是10-250KD，请问这两个蛋白可以一起跑吗，胶的浓度多少合适呢，大家给点建议吧，万分感谢
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1楼 2013-09-05 19:24:31
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peakg7

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-05 22:20:55
qinchen1018: 金币+2, ★有帮助 2013-09-08 11:50:30
可以，差别这么大，跑梯度胶比较好，但是自己没法配。个人建议分开跑。
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2楼2013-09-05 19:31:31
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xiangyu9356

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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qinchen1018: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-09-08 11:50:52
一起跑应该是没有问题的。不连续SDS-PAGE分离你这两种蛋白也是可以的，建议胶的浓度：浓缩胶5%，分离胶12%。电泳时建议你溴酚蓝可不必跑到胶的下缘即停止，小分子量的蛋白条带可能更整齐一些。祝好！
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满堂花醉三千客，更无一人是知音。
3楼2013-09-06 09:48:11
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xiwenhui

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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可以的，自己做一块底下15%上边8%的梯度胶就可以！没问题的
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4楼2013-09-06 14:36:34
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