24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2577  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

JAYWEN书生

银虫 (小有名气)

[求助] Nde1和BamH1做双酶切,T载上测过序,现在要从T载上切下,连到表达载体PET-23a

Nde1和BamH1做双酶切,T载上测过序,现在要从T载上切下,连到表达载体PET-23a,转化挑单菌落进行菌液PCR有目的条带,提质粒以质粒为模板PCR没有条带,质粒跑胶好像是空的,但是没有连接上表达载体的目的基因怎么可以扩展的……(因为每次对提质粒用的菌液进行PCR都有目的条带,阴性对照也有很浅的条带,很浅,应该不影响吧),求解释,因为下面急着做突变~~~感谢各位大神!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JAYWEN书生

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-05 01:46:53
阴性对照的条带与目的条带大小相同吗?如果是,说明PCR体系污染了,问题不是已经很大了吗?

大小一样大,PCR体系污染,现在只有可能是引物污染了,水是新的,Master MIX也是新的
7楼2013-09-05 13:36:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

忽而今秋

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-05 15:02:12
你质粒提的有没有问题?

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2013-09-05 00:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-09-05 15:01:30
阴性对照的条带与目的条带大小相同吗?如果是,说明PCR体系污染了,问题不是已经很大了吗?
3楼2013-09-05 01:46:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-05 15:01:53
这种情况下,污染的可能性很大
自主创业者,捣腾生物试剂
4楼2013-09-05 10:56:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 电子信息270求调剂 +9 terminal469 2026-04-07 9/450 2026-04-09 10:28 by 小物理化学
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 一志愿华南师范大学-22408计算机-292分-求华南师范大学调剂 +5 爱读书的小鳄鱼 2026-04-02 5/250 2026-04-08 14:55 by CAS小花工
[考研] 287求调剂 +6 Fnhc 2026-04-07 6/300 2026-04-08 10:05 by xingguangj
[考研] 调剂 +18 不逢春 2026-04-05 19/950 2026-04-07 22:04 by lijunpoly
[考研] 085602调剂 初试总分335 +10 19123253302 2026-04-05 10/500 2026-04-07 15:23 by 小乔同学ya
[考研] 277工科求调剂 +10 1915668 2026-04-04 11/550 2026-04-06 23:53 by 心媛意北
[考研] 工科 22408 267求推荐 +4 wanwan00 2026-04-05 5/250 2026-04-06 22:47 by chenzhimin
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +6 刘墨墨 2026-04-06 6/300 2026-04-06 19:36 by lijunpoly
[考研] 285求调剂 +5 mapmath 2026-04-06 6/300 2026-04-06 17:18 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 求调剂 +5 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 10:13 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 08专硕275调剂 +5 AaAa7420 2026-04-05 5/250 2026-04-05 18:01 by jkddd
[考研] 11408,335分,本科211,求调剂,可转专业 +5 鳄梨大鳄鱼 2026-04-03 5/250 2026-04-04 22:49 by chongya
[考研] 341求调剂 +3 洛多罗 2026-04-02 4/200 2026-04-04 21:36 by 智能智慧
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突, 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:16 by 兔突突突,
信息提示
请填处理意见