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gsq0315

铜虫 (小有名气)

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虫号: 2048765

[交流] 半定量内参条带不一致

做半定量，选16s做内参基因，经过不同循环数，相同模板，对照和实验组的内参表达不一致，没有规律性，请问该怎么办才能调一致

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1楼 2013-09-02 08:49:31

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grape_vine

金虫 (小有名气)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-04 15:28:53

1, 调整模板量, 尽量让不同样品的内参在同一循环出现电泳带
2. 建议PCR过程中超过20个循环后，在内参一致的情况下，每三个循环取5ul出来，最后到32或者35，然后一起跑胶做的好地话，可以相对比较准确的估计目的基因的表达差异。

4楼2013-09-03 08:09:34

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