24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2535  |  回复: 4

yanglei174

金虫 (小有名气)

[求助] 怎么替换启动子,以及引物怎么设计~~~

最近在做启动子替换,要替换的启动子大小为62bp,老师的意思就是直接合成,但我现在不知道需要合成哪些,直接合成那60bp,是不是回来后期实验不好做啊???还有合成需要注意哪些问题~~谢谢大家了
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2464514082

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-30 17:47:22
引物设计用Primer5.0就可以,下载个使用说明,上面有评分什么的
2楼2013-08-30 17:08:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
3楼2013-08-31 08:00:35
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-09-01 02:54:18
你是想替换启动子中的部分片段(62bp)?如果那样的话直接合成对于的片段,然和分别和上、下游片段做个overlap PCR获得替换后的全长启动子,然和重新连接到载体就好
互助互励,共奋共进!!
4楼2013-08-31 08:56:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wahogui

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-01 02:54:25
你可以合成两条互补的引物,列如  
     5-AAATTTGCCCCYYY-3
3-XXXTTTAAACGGGG-5

X,y代表酶切缺口,如果是平末端连接那么就不要x,y碱基了,两链条引物合成以后直接通过退火皆可以变成双连DNA了,估算好浓度就可以用来做连接实验了。
5楼2013-08-31 10:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanglei174 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-04 3/150 2026-04-05 11:19 by guoweigw
[考研] 调剂 +11 JLLLLLLLLLL 2026-04-03 11/550 2026-04-04 22:21 by hemengdong
[考研] 315求调剂 +13 小羊小羊_ 2026-04-02 14/700 2026-04-04 20:30 by 蓝云思雨
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +9 hanamiko 2026-03-30 9/450 2026-04-04 11:04 by 猪会飞
[考研] 求材料调剂,一志愿郑州大学289分 +15 硕星赴 2026-04-03 15/750 2026-04-04 01:01 by userper
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 312 化工或制药调剂 +8 小小墨123 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:12 by zhouxiaoyu
[考研] 279求调剂 +5 傅文秋 2026-04-02 5/250 2026-04-02 18:10 by 笔落锦州
[考研] 282求调剂 +13 呼吸都是减肥 2026-04-01 13/650 2026-04-02 14:10 by baoball
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 材料化工340求调剂 +5 jhx777 2026-03-30 5/250 2026-04-02 12:45 by smileboy2006
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 322求调剂 +5 熹僖XX 2026-03-31 6/300 2026-04-02 10:08 by 求调剂zz
[考研] 354求调剂 +4 lxb598 2026-03-31 5/250 2026-04-02 09:55 by Jaylen.
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 292求调剂 +17 木虫er12138 2026-04-01 17/850 2026-04-01 21:37 by 七度不信任
[考研] 求调剂 +4 DADA怪 2026-03-31 4/200 2026-04-01 14:30 by ZXlzxl0425
[考研] 267求调剂 +13 uiybh 2026-03-31 13/650 2026-04-01 10:25 by 探123
[考研] 085601一志愿西北工业大学初试346 +4 085601初试346 2026-03-30 4/200 2026-03-31 07:47 by jp9609
信息提示
请填处理意见