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margsg

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助免疫组化,急!急!急!

本人今年毕业,但是免疫组化一直有问题~~急于求解,问题如下:
1)容易脱片;
2)展片后60度烤片2h后调整到37度6h,发现片子上很多的气泡,而且有些气泡还在组织下面,一些大气泡下面扎破后有水;
3)苏木精复染怎么控制时间,染成什么样子比较好?去分化到什么程度比较好?大神能帮忙分别给几个染色合适的图不?
4)DAB染色的时候我用显微镜观察的时候视野里看到的是:细胞周围很对水珠,而且折光很强,看不清显色程度。求解释?你们做的时候不知道是怎么个样子?Sample Text
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yyjy84102

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,我有一直做免疫组化和HE染色,针对你提出 疑问,我们共同讨论一下:
1)脱片的问题,在我的实验过程中没有发生过,结合第二个问题,我把我的实验流程说下:正常切片后,就是42度展片,然后就是捞片,这个应该没问题的吧;再者,捞片之后一定要注意将片子垂直放置,最好底下垫层卫生纸(吸水),待片子上的是基本沥干后,在烤片,时间可以长点(我是4-5 h),这样基本上组织下面是不会有水的了~
2)HE染色,个人的染色条件不一样,这个要根据预实验看到,分化时间不要太长,基本几秒,
3)DAB显色的时候看到水珠,还是封片之后啊,如果是封片之后的就是脱水没脱好,要是染色的时候应该是有水的吧,这个不知道鸟~
不知道现在应助,是否对你的实验还有帮助不?
2楼2013-10-21 19:28:09
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