24小时热门版块排行榜    

查看: 2779  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nan_scc520

银虫 (正式写手)

[交流] PCR割胶纯化问题 已有2人参与

最近采用1073R和RL1做引物进行PCR后割胶纯化,发现目的条带上面有一条不太亮的杂带,虽然暗,但是还是能够看出来的
求教各位的大神这是怎么回事

[ 来自小组 骷髅党 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

tomorrowisanotherdayornothingthanthefirstkiss
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susan小水

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我进行了二次纯化  但是还是有杂带   我的pcr条件优化了两个月  也感觉优化不出来单一的带  也很纠结
原谅我一生,放纵不羁爱自由
4楼2013-08-29 09:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lecou

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-28 13:52:44
这个问题我也遇到过,pcr产物浓度太高的时候,跑胶之后可能会在混杂一些杂带,不容易分开。但是纯化之后DNA浓度降低,就比较容易分开,所以会出现弱杂带。我一般都忽略不计,它浓度极低,并且构建重组质粒后还是要测序,也可以排除杂带问题。
希望自己能平常心面对实验中的种种
2楼2013-08-28 12:36:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nan_scc520

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lecou at 2013-08-28 12:36:20
这个问题我也遇到过,pcr产物浓度太高的时候,跑胶之后可能会在混杂一些杂带,不容易分开。但是纯化之后DNA浓度降低,就比较容易分开,所以会出现弱杂带。我一般都忽略不计,它浓度极低,并且构建重组质粒后还是要测 ...

我后续想做焦磷酸测序,有杂带的话对后续影响很大啊
tomorrowisanotherdayornothingthanthefirstkiss
3楼2013-08-28 14:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nan_scc520

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by susan小水 at 2013-08-29 09:53:30
我进行了二次纯化  但是还是有杂带   我的pcr条件优化了两个月  也感觉优化不出来单一的带  也很纠结

今天又改进了实验条件,貌似很成功了
tomorrowisanotherdayornothingthanthefirstkiss
5楼2013-08-29 14:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:07 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 03:05 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:52 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 02:45 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 3/150 2026-02-08 02:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:27 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:25 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 5/250 2026-02-08 02:12 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 02:07 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 02:05 by vs90ilomwc
[找工作] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 01:46 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:45 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章,我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 01:32 by vs90ilomwc
[教师之家] 有院领导为了换新车,用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生,欢迎大家推荐交流(博导是本人) +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生|MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[基金申请] 面上项目申报 +3 Tide man 2026-02-01 3/150 2026-02-05 22:56 by god_tian
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
请填处理意见