24小时热门版块排行榜    

查看: 1769  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dirtyangle

新虫 (初入文坛)

[求助] 空气中氧化能增加由二硫键形成的二聚体蛋白质的量吗

我现在做的蛋白是个二聚体,现在跑非还原电泳能看到二聚体,但是量不多,想用空气中氧化的办法增加二聚体的量,不知道各位大人们有知道这个方法的吗,有没有相关论文呢?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dirtyangle(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖应助! 2013-08-24 02:09:26
如果操作时间短可以加入放映体系中以Beta-巯基乙醇或DTT,但是时间长了也不行,而且要考虑Beta-巯基乙醇或DTT可能有其他影响,尤其是后期要是用凝胶电泳进行染色的话,Beta-巯基乙醇可能对一些染料会有影响(比如银染有时可能会受到影响),染色前最好用超滤去掉,那时离心机最好在封闭的充氮环境中运行。
4楼2013-08-23 23:09:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-24 02:09:08
我读过有文章研究蛋白的还原态, 先用DTT把蛋白所有的二硫键断开, 然后过柱子除去过量DTT, 接下来为了保证Cystine不会在没有DTT的情况下重新形成二硫键,就在完全无氧的情况下进行试验.
既然为了防止二硫键重新生成, 需要在完全无氧的条件下操作,想必氧气是可以增加二硫键的
不过谨慎怀疑作用有限. 你如果想用氧气饱和的缓冲液试下也无妨,无非就是先往缓冲液里吹10分钟氧气,搅拌加冒泡.我以前有这么做过,氧气在冷水里的溶解度还是不错的
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2013-08-23 22:05:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dirtyangle(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-24 02:09:18
二硫键会在氧气中形成,有氧催化巯基生成二硫键。所以要防止氧化,一是将反应器皿放入充氮的容器,二是用碘乙酸等封闭巯基,以后再去掉。

二硫键的形成本身就会加快或者一定程度上改变蛋白质的折叠构象或者折叠过程,而不是像过去认为的那样,二硫键形成只是被动的稳定三维构象。
3楼2013-08-23 23:05:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见