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[求助]
用简并引物扩不出cDNA,并且没有内参,求帮助
Sample Text自己设计了三对简并引物,结果用cDNA做RT-pcr没有条带,求高手帮助。所获的目的片段大小大概在500bp左右,因为所做的物种比较冷,没有相关的信息,也没有内参,比较纠结。之前提了肌肉的RNA,之后做了cDNA,然后根据简并引物跑了温度梯度pcr,有一个条带跑出来了。之后根据跑出来的产物温度重新做了pcr,但是一个都没有跑出来,请问是怎么回事?
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20130807rna.jpg
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温度梯度pcr.jpg |
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