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用简并引物扩不出cDNA，并且没有内参，求帮助
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Sample Text自己设计了三对简并引物，结果用cDNA做RT-pcr没有条带，求高手帮助。所获的目的片段大小大概在500bp左右，因为所做的物种比较冷，没有相关的信息，也没有内参，比较纠结。之前提了肌肉的RNA，之后做了cDNA，然后根据简并引物跑了温度梯度pcr，有一个条带跑出来了。之后根据跑出来的产物温度重新做了pcr，但是一个都没有跑出来，请问是怎么回事？ 20130807rna.jpg  温度梯度pcr.jpg |
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