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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 构建载体问题
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happyheleny

铜虫 (初入文坛)

[求助] 构建载体问题

现有未知的双质粒。PCR能够扩增出100bp和2kb的片段，这两对引物已经知道。通过测序2Kb序列能够知道质粒是什么么？如果能，怎么做？
请各位高手给予指点！！！
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1楼 2013-08-13 13:13:55
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
happyheleny: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-08-13 15:11:32
小丹木木: 金币+2, 鼓励 应助 2013-08-13 17:22:59
未知的双质粒？不知道是完全没有信息还是知道其中一部分信息?如果完全没有信息，不知道你扩增的意义在哪里？如果你能扩增出上述两个目的片段，通过测序知道核苷酸序列，利用NCBI blast比对看看是否能找出载体信息，据我所知，如果你非要按照你描述的这种情况知道这个载体信息，就只有这一种办法。
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2楼2013-08-13 13:45:01
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happyheleny

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huguangdong at 2013-08-13 13:45:01
未知的双质粒？不知道是完全没有信息还是知道其中一部分信息?如果完全没有信息，不知道你扩增的意义在哪里？如果你能扩增出上述两个目的片段，通过测序知道核苷酸序列，利用NCBI blast比对看看是否能找出载体信息， ...

好的，谢谢。基本是完全没信息，就是很久前构建的，克隆2k片段用于制作marker很好用，但是大家都不记得以前怎么构建的了，用的什么载体。
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3楼2013-08-13 15:14:20
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happyheleny

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huguangdong at 2013-08-13 13:45:01
未知的双质粒？不知道是完全没有信息还是知道其中一部分信息?如果完全没有信息，不知道你扩增的意义在哪里？如果你能扩增出上述两个目的片段，通过测序知道核苷酸序列，利用NCBI blast比对看看是否能找出载体信息， ...

我只知道100bp和2kb左右的引物，测序的话，测多长的呢？测那个2kb的意义大么?
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4楼2013-08-13 15:17:26
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