| 查看: 503 | 回复: 0 | ||
小墨825新虫 (小有名气)
|
[求助]
急求网上膜蛋白提取方法的文献来源！！！
|
|
3. 从新鲜样品中提取疏水性膜蛋白（Triton X-114去污剂法） 1) 配制疏水性蛋白提取液（非裂解液）：1% Triton X-114，150mM NaCl, 10mM Tris-HCl，1mM EDTA，调pH值至8.0备用。 2) 菌液于4℃条件下15000g离心15min收集菌体；用1ml 含有5mM MgCl2 的PBS洗涤3次，最后于4℃条件下15000g离心15min收集菌体。 3) 菌体沉淀加入1ml冷提取液，于4℃条件下放置2h，17000g离心10min，去除沉淀取上清。 4) 将上述上清中的Triton X-114含量增加到2%，再加入20mM的CaCl2抑制部分蛋白酶活性，37℃条件下放置10min使其分层。室温下1000g离心10min使液相和去污相充分分层。 5) 将液相和去污相分开，分别用10倍体积的冷丙酮在冰上沉淀45min。 6) 于4℃条件下17000g离心30min，用去离子水洗涤沉淀3次。 7) 将沉淀溶解在1% SDS溶液中，测定蛋白浓度，比较液相和去污相中蛋白提取效率，一般是去污相中疏水性膜蛋白较多，适于进一步蛋白实验。 8) SDS-PAGE进一步分析液相和去污相的蛋白图谱。 急求这个方法的文献来源 是否可靠！？ |
回复此楼» 猜你喜欢
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有54人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
蛋白质的共价修饰的测定的试验方法----凌波丽 个人总结
已经有19人回复
- 如何提取细胞膜蛋白和细胞器蛋白
已经有3人回复
- SDS-PAGE跑膜蛋白为什么会这样
已经有12人回复
- 急求，怎么出去变性后蛋白质中的盐酸胍
已经有8人回复
- 细胞提取蛋白，做western blotting，怎么知道是提取总蛋白还是膜蛋白呢？
已经有4人回复
- 组织和细胞中，膜蛋白，胞浆蛋白，核蛋白提取裂解液区别
已经有5人回复
- 膜蛋白合成，推荐几个比较好的公司
已经有12人回复
- 求适合western bloting的提取植物组织蛋白提取方法
已经有12人回复
- 如何快速 找到所有膜蛋白
已经有20人回复
- 膜蛋白提取问题！
已经有8人回复
- 关于蛋白分离纯化实验设计思路！！！！！！！急急急
已经有11人回复
- 【求助】蛋白提取
已经有6人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
- 【求助/交流】如何提取细菌的细胞膜
已经有12人回复
- 【求助/交流】植物蛋白提取方法讨论
已经有14人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
50