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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酵母单杂求助
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海阔天空187

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母单杂求助 已有1人参与

各位好，我最近在做酵母单杂，因为是新手，出现各种问题，请求大家帮忙
1. PAbAi诱饵载体构建好了后，转入Y1HGOLD酵母菌中，为了验证是否整合到酵母基因组中，提取酵母质粒后，转入大肠杆菌（A抗性），结果没长出斑，郁闷
2. 共转后，我将以下的几个转入带有诱饵载体的酵母中：1-水；2-空的AD载体；3-目的转录因子；涂在ura-leu-二缺培养基上，结果水对照是什么都没长，但是空的AD载体和目的转录因子却长满了，用200ng/ml AbA 在二缺培养基上进行筛选时，还是都长了，这是为什么啊，我都已经重复三次了，每次都是同样的结果，该怎么解决这个问题啊
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1楼 2013-07-24 21:38:11
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nalanzhen33

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
海阔天空187(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-25 14:29:53
请将您先对目的基因进行简单的描述！
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2楼2013-07-25 11:21:41
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海阔天空187

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nalanzhen33 at 2013-07-25 11:21:41
请将您先对目的基因进行简单的描述！

我的pAbAi载体上连的是50bp顺式作用元件重复两次的片段，共100bp. 目的转录因子是水稻的CBF，连在T7AD载体上。
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3楼2013-07-25 21:29:05
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 海阔天空187 at 2013-07-25 21:29:05
我的pAbAi载体上连的是50bp顺式作用元件重复两次的片段，共100bp. 目的转录因子是水稻的CBF，连在T7AD载体上。...

那套系统不靠谱，根本就不行的

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-07-24 21:52:05
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