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海阔天空187

金虫 (小有名气)

[求助] 酵母单杂求助 已有1人参与

各位好,我最近在做酵母单杂,因为是新手,出现各种问题,请求大家帮忙
1. PAbAi诱饵载体构建好了后,转入Y1HGOLD酵母菌中,为了验证是否整合到酵母基因组中,提取酵母质粒后,转入大肠杆菌(A抗性),结果没长出斑,郁闷
2. 共转后,我将以下的几个转入带有诱饵载体的酵母中:1-水;2-空的AD载体;3-目的转录因子;涂在ura-leu-二缺培养基上,结果水对照是什么都没长,但是空的AD载体和目的转录因子却长满了,用200ng/ml AbA 在二缺培养基上进行筛选时,还是都长了,这是为什么啊,我都已经重复三次了,每次都是同样的结果,该怎么解决这个问题啊
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nalanzhen33

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
海阔天空187(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你的更多精彩。 2013-07-25 14:29:53
请将您先对目的基因进行简单的描述!
2楼2013-07-25 11:21:41
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海阔天空187

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by nalanzhen33 at 2013-07-25 11:21:41
请将您先对目的基因进行简单的描述!

我的pAbAi载体上连的是50bp顺式作用元件重复两次的片段,共100bp. 目的转录因子是水稻的CBF,连在T7AD载体上。
3楼2013-07-25 21:29:05
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 海阔天空187 at 2013-07-25 21:29:05
我的pAbAi载体上连的是50bp顺式作用元件重复两次的片段,共100bp. 目的转录因子是水稻的CBF,连在T7AD载体上。...

那套系统不靠谱,根本就不行的

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-07-24 21:52:05
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