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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这个是变性超螺旋么？
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happyheleny

铜虫 (初入文坛)

[求助] 这个是变性超螺旋么？

大肠杆菌提质粒——最下面出现的条带是超螺旋变性么？怎么才能避免呢？我用试剂盒做的大量提取，加溶液I和溶液II后非常轻柔的混匀的。溶液II裂解的时间4分钟也不算长。
这个是变性超螺旋么？
未命名.JPG



[ Last edited by happyheleny on 2013-7-24 at 14:45 ]
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1楼 2013-07-24 14:43:33
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
happyheleny(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-24 16:40:27
提取出来的质粒是什么状态并不重要，关键是质粒纯且浓度高就好了。
单酶切下就知道你的质粒纯不纯，是不是有RNA污染。
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2楼2013-07-24 16:24:10
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eulota

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+3, 感谢发帖应助，帮助虫子 2013-07-24 20:28:52
amisking: 回帖置顶 2013-07-24 20:28:54
其实你的超螺旋状态质粒占了大部分，提取的质量已经很好了。
而相对来说，断裂的质粒部分占的比例很少，是不是不需要纠结这个？
我认为，最亮的那个条带是超螺旋，前面的两条更小的带可能是断裂的片段，而非楼主所说的“超螺旋变性”。
电泳泳道最前方并没有看到RNA的污染。

仅供参考。
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3楼2013-07-24 18:43:56
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