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zx1990

金虫 (小有名气)

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[求助] 氨氧化细菌PCR结果已有1人参与

求教诸位大神，我做的安氧化细菌，PCR的结果有很明显的非特异性扩增，根据计算退火温度应该子啊54到56度之间，我做了55,56,57，结果都有非特异性扩增，56度的结果还很明显，不知道有没有人遇到过这种情况，用的引物是amoA1F和amoA2R。我要做克隆，可不可以忽略非特异性扩增，直接切我的目的片段？

退火温度562013-07-23 13hr 00min.jpg

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1楼 2013-07-23 15:03:57

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秋之静美

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引用回帖:

8楼: Originally posted by swach at 2014-07-08 18:23:52
楼主，你好，我现在也要做氨氧化细菌，引物和你选择的一样。不知道你用的反应条件是什么？可以给我分享下吗？我用文献中的条件进行PCR，也出现了两条条带。PCR扩增长度应该是490bp吧，谢谢楼主。

你好，你的氨氧化细菌PCR条件摸好了吗？我也再做，同求