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hlfhehe

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相法分离植物中未知黄酮类物质

想用HPLC对中午中未知的黄酮类物质进行分离，谁做过啊，有什么好方法，或者是我该怎么做那（如：怎么确定流动相比例等）
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1楼2013-07-21 19:11:32
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
hlfhehe: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-03 17:15:53
个人经验，分离黄酮用甲酸、乙酸好点。磷酸当然也可以。
极相似的话，如果调流动相比例不行的话，当然还可以尝试加不同的酸、碱、盐，调不同的pH来改变选择性，甚至换别的有选择性的柱子，那样去试验的话工作量大，效果可能不明显。
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天道酬勤！
4楼2013-07-23 18:07:51
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hlfhehe: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-03 17:16:04
用甲醇和0.1%j甲酸水溶液，梯度洗脱，从0%甲醇，一个小时内梯度洗脱到100%甲醇，看看你要的目标化合物出现在哪里，计算这时候的甲醇比例，然后以这个比例为参考，调整流动相中有机相和水相的比例，进行等度或者梯度洗脱，找出合适的比例来分离你的目标化合物。
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天道酬勤！
2楼2013-07-23 15:02:58
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hlfhehe

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by netscaner at 2013-07-23 15:02:58
用甲醇和0.1%j甲酸水溶液，梯度洗脱，从0%甲醇，一个小时内梯度洗脱到100%甲醇，看看你要的目标化合物出现在哪里，计算这时候的甲醇比例，然后以这个比例为参考，调整流动相中有机相和水相的比例，进行等度或者梯度 ...

谢谢！还有是不是也可以用磷酸试试，用调一下PH（2-3）左右不？用梯度的话，如果两个物质极性特别相似也是改变流动相比例来分离，有没有别的什么法子可以分开的
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3楼2013-07-23 17:21:11
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hlfhehe

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by netscaner at 2013-07-23 18:07:51
个人经验，分离黄酮用甲酸、乙酸好点。磷酸当然也可以。
极相似的话，如果调流动相比例不行的话，当然还可以尝试加不同的酸、碱、盐，调不同的pH来改变选择性，甚至换别的有选择性的柱子，那样去试验的话工作量大， ...

谢谢！
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5楼2013-07-24 11:19:23
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