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hlfhehe

金虫 (小有名气)

[求助] 高效液相法分离植物中未知黄酮类物质

想用HPLC对中午中未知的黄酮类物质进行分离,谁做过啊,有什么好方法,或者是我该怎么做那(如:怎么确定流动相比例等)
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hlfhehe: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-03 17:16:04
用甲醇和0.1%j甲酸水溶液,梯度洗脱,从0%甲醇,一个小时内梯度洗脱到100%甲醇,看看你要的目标化合物出现在哪里,计算这时候的甲醇比例,然后以这个比例为参考,调整流动相中有机相和水相的比例,进行等度或者梯度洗脱,找出合适的比例来分离你的目标化合物。
天道酬勤!
2楼2013-07-23 15:02:58
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hlfhehe

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by netscaner at 2013-07-23 15:02:58
用甲醇和0.1%j甲酸水溶液,梯度洗脱,从0%甲醇,一个小时内梯度洗脱到100%甲醇,看看你要的目标化合物出现在哪里,计算这时候的甲醇比例,然后以这个比例为参考,调整流动相中有机相和水相的比例,进行等度或者梯度 ...

谢谢!还有是不是也可以用磷酸试试,用调一下PH(2-3)左右不?用梯度的话,如果两个物质极性特别相似也是改变流动相比例来分离,有没有别的什么法子可以分开的
3楼2013-07-23 17:21:11
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
hlfhehe: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-03 17:15:53
个人经验,分离黄酮用甲酸、乙酸好点。磷酸当然也可以。
极相似的话,如果调流动相比例不行的话,当然还可以尝试加不同的酸、碱、盐,调不同的pH来改变选择性,甚至换别的有选择性的柱子,那样去试验的话工作量大,效果可能不明显。
天道酬勤!
4楼2013-07-23 18:07:51
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hlfhehe

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by netscaner at 2013-07-23 18:07:51
个人经验,分离黄酮用甲酸、乙酸好点。磷酸当然也可以。
极相似的话,如果调流动相比例不行的话,当然还可以尝试加不同的酸、碱、盐,调不同的pH来改变选择性,甚至换别的有选择性的柱子,那样去试验的话工作量大, ...

谢谢!
5楼2013-07-24 11:19:23
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