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1楼2013-07-17 13:47:35

hanyuem

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gyesang: 回帖置顶 2013-07-18 14:19:09
gyesang: 金币+2, 正解！鼓励交流！ 2013-07-18 14:19:23

引用回帖:

4楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 15:41:26
对于你的挑选，建议用目的基因的引物进行菌体PCR验证，插反就是扩增质粒片段，插正确就是扩增目的基因片段。因为都在同一个载体环上嘛。...

这就说明您的片段连接上了而且是连反了，因为同尾酶的原因，所以切不下来

8楼2013-07-17 18:42:19

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huanghznd

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blueghost2: 金币+2 2013-07-17 15:29:25

两个建议，1，换酶切位点，2 ，多挑一些克隆子，验证，运气好也可以挑到正确的

2楼2013-07-17 14:29:29

blueghost2

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2楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-17 14:29:29
两个建议，1，换酶切位点，2 ，多挑一些克隆子，验证，运气好也可以挑到正确的

换酶切位点太麻烦还得重新设计引物。我目前一直在挑斑，希望运气好一点。。

3楼2013-07-17 15:29:17

huanghznd

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引用回帖:

3楼: Originally posted by blueghost2 at 2013-07-17 15:29:17
换酶切位点太麻烦还得重新设计引物。我目前一直在挑斑，希望运气好一点。。...

对于你的挑选，建议用目的基因的引物进行菌体PCR验证，插反就是扩增质粒片段，插正确就是扩增目的基因片段。因为都在同一个载体环上嘛。

4楼2013-07-17 15:41:26