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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 分光光度法测蛋白质的乳化性
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nisiying0701

木虫 (正式写手)

stan

[求助] 分光光度法测蛋白质的乳化性

最近用分光光度法测蛋白的乳化性，在用高速匀浆机将蛋白溶液和花生油进行乳化后，在中间形成了乳化层，下面是透明的蛋白溶液层，文献上说乳化后从溶液底部吸取50μl，加入5ml0.1%SDS混合后在500纳米处测定。这里取样的溶液底部具体是指哪？是指乳化层底部，还是整个油水体系的的底部（即蛋白溶液层底）？烦请各位不吝赐教！！！万分感谢！！！
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whatdoesn'tkillyoumakesyoustronger.
1楼 2013-07-17 12:58:25
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vivi1231

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
nisiying0701: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-17 17:45:35
离容器底部0.5cm左右，取的位置应该是在蛋白溶液层，要保证每次取样位置一样，能说明问题即可。
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2楼2013-07-17 13:57:17
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nisiying0701

木虫 (正式写手)

stan
引用回帖:
2楼: Originally posted by vivi1231 at 2013-07-17 13:57:17
离容器底部0.5cm左右，取的位置应该是在蛋白溶液层，要保证每次取样位置一样，能说明问题即可。

谢谢，能否请教一下乳化性测定的原理，在网上看到原理：乳化性越好，颗粒越小，吸光度越小（光对较大颗粒比较敏感，这个跟你的吸收波长有关的）；乳化稳定性越好，吸光度随时间的变化越小，也即是粒径变化不大。这里的意思是说，如果乳化性越好，乳化层越易形成，则下层的蛋白溶液就越清澈吗？
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whatdoesn'tkillyoumakesyoustronger.
3楼2013-07-17 17:45:11
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vivi1231

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
nisiying0701: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-07-20 08:52:50
引用回帖:
3楼: Originally posted by nisiying0701 at 2013-07-17 17:45:11
谢谢，能否请教一下乳化性测定的原理，在网上看到原理：乳化性越好，颗粒越小，吸光度越小（光对较大颗粒比较敏感，这个跟你的吸收波长有关的）；乳化稳定性越好，吸光度随时间的变化越小，也即是粒径变化不大。这 ...

乳化性越好，吸光值越大，乳化稳定性越好，越不容易分层，吸光值变化也就越小。刚开始乳化的时候是均一的乳液，不存在分层，放置一段时间才出现分层，说明乳液不稳定，下层越清澈说明乳液越不稳定。
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4楼2013-07-19 13:06:12
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nisiying0701

木虫 (正式写手)

stan
引用回帖:
4楼: Originally posted by vivi1231 at 2013-07-19 13:06:12
乳化性越好，吸光值越大，乳化稳定性越好，越不容易分层，吸光值变化也就越小。刚开始乳化的时候是均一的乳液，不存在分层，放置一段时间才出现分层，说明乳液不稳定，下层越清澈说明乳液越不稳定。...

有些文献上说，匀浆后迅速从溶液底部取50μl的乳浊液，是不是要匀浆成均一的乳液再立即取，我的蛋白乳化性不好，匀浆后，总有蛋白水溶液在底部，怎么办？
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whatdoesn'tkillyoumakesyoustronger.
5楼2013-07-20 09:04:09
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vivi1231

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by nisiying0701 at 2013-07-20 09:04:09
有些文献上说，匀浆后迅速从溶液底部取50μl的乳浊液，是不是要匀浆成均一的乳液再立即取，我的蛋白乳化性不好，匀浆后，总有蛋白水溶液在底部，怎么办？...

乳化性也太差了吧，有没有尝试加大蛋白浓度呢？乳化性这么差你测乳化性的意义何在呢。。。
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6楼2013-07-20 20:04:40
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nisiying0701

木虫 (正式写手)

stan
引用回帖:
6楼: Originally posted by vivi1231 at 2013-07-20 20:04:40
乳化性也太差了吧，有没有尝试加大蛋白浓度呢？乳化性这么差你测乳化性的意义何在呢。。。...

也没办法啊，这种植物是我们园刚引进的，以前没做过，我就当是填补空白了，可否与你交流下？
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whatdoesn'tkillyoumakesyoustronger.
7楼2013-07-23 12:49:06
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vivi1231

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by nisiying0701 at 2013-07-23 12:49:06
也没办法啊，这种植物是我们园刚引进的，以前没做过，我就当是填补空白了，可否与你交流下？...

可以
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8楼2013-07-24 17:18:40
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大滨和果子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by vivi1231 at 2013-07-17 13:57:17
离容器底部0.5cm左右，取的位置应该是在蛋白溶液层，要保证每次取样位置一样，能说明问题即可。

想问一下这里说的蛋白质溶液式用蛋白质和什么配置的?是水还是缓冲溶液?配出来应该是溶液还是悬浮液？我是碱提酸沉的蛋白质，用pH7的磷酸钠缓冲液溶化不了，是悬浮的
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9楼2016-01-06 14:32:19
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毛毛zyn

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 大滨和果子 at 2016-01-06 14:32:19
想问一下这里说的蛋白质溶液式用蛋白质和什么配置的?是水还是缓冲溶液?配出来应该是溶液还是悬浮液？我是碱提酸沉的蛋白质，用pH7的磷酸钠缓冲液溶化不了，是悬浮的...

你好，我的蛋白在ph7的时候也是不溶的，所以想问你一下，你的问题解决了吗？求教。。
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10楼2016-03-01 15:59:51
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