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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 链霉菌菌体破碎

看到文献中有采用加入玻璃珠子然后漩涡10-30min破碎菌体的方法,不知道哪位大侠操作过,普通的漩涡混匀器就能够实现吗?
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canalboy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助! 2013-07-15 23:00:43
我觉得这个方案不太可行吧

我在细菌实验里做过200转左右用玻璃珠震摇细菌菌液的,也只是能打散细菌块,不会把细菌弄破。

霉菌一般细胞壁更厚,有的时候破菌都要加蜗牛酶的(这个我不是很确定)。所以普通的涡旋混合仪不太可能实现的。但是这个方法尝试成本很低啊,姑且一试吧。
2楼2013-07-15 21:15:09
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by canalboy at 2013-07-15 21:15:09
我觉得这个方案不太可行吧

我在细菌实验里做过200转左右用玻璃珠震摇细菌菌液的,也只是能打散细菌块,不会把细菌弄破。

霉菌一般细胞壁更厚,有的时候破菌都要加蜗牛酶的(这个我不是很确定)。所以普通的涡 ...

这是微生物界一位大牛的文献中提到的,应该没问题,关键是漩涡采用的是什么仪器是重点。多谢你的回复。
3楼2013-07-16 08:38:09
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jjssfan

新虫 (小有名气)

你可以用提取细菌质粒或者DNA试剂盒试剂然后加一点溶菌酶(微碱性)就可以破碎菌体
4楼2013-07-16 13:05:10
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jjssfan at 2013-07-16 13:05:10
你可以用提取细菌质粒或者DNA试剂盒试剂然后加一点溶菌酶(微碱性)就可以破碎菌体

多谢关注,但是这种处理方法不利用我后续的操作
5楼2013-07-17 08:28:06
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千丶百度

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
joan198108: 金币+1, ★有帮助 2013-07-17 19:10:34
应该可以。我们现在用均质仪2000r/min X 30s X 2进行链霉菌菌体破碎(添加0.2mm玻璃珠);计算一下的话普通涡旋振荡时间长一点应该功效是一样的。
6楼2013-07-17 10:43:56
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chengjg

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by joan198108 at 2013-07-16 08:38:09
这是微生物界一位大牛的文献中提到的,应该没问题,关键是漩涡采用的是什么仪器是重点。多谢你的回复。...

信结果不信大牛,大牛也有靠不住的时候呀。
7楼2013-07-17 18:44:25
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 千丶百度 at 2013-07-17 10:43:56
应该可以。我们现在用均质仪2000r/min X 30s X 2进行链霉菌菌体破碎(添加0.2mm玻璃珠);计算一下的话普通涡旋振荡时间长一点应该功效是一样的。

准备实验一下
8楼2013-07-17 19:11:09
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by chengjg at 2013-07-17 18:44:25
信结果不信大牛,大牛也有靠不住的时候呀。...

不要盲从大牛是对的,但是对于美国科学院院士我觉得多数情况应该是对的
9楼2013-07-17 19:11:58
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