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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)

[求助] 5'race 扩不出来目的条带 求指教

各位同僚前辈好,我最近做RACE试验,3'做出来了好久了,但是5'端扩了好久都没有出来,不知道啥原因!引物也换了,做的巢式PCR,两轮!出来的带都是弥散的或者中间特别亮、两侧弥散!
电泳图,泳道1-5,23为全引物扩增,45为单引物扩增。
附件为引物信息。
请指教!5'race 扩不出来目的条带 求指教
2013.6.jpg
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  • 附件 1 : 引物信息.docx
  • 2013-07-02 10:30:00, 15.63 K

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Eva2009

禁虫 (初入文坛)

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4楼2013-07-09 08:47:19
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zhouking8758

木虫 (正式写手)

你的目标带多大呢?
2楼2013-07-03 10:56:50
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouking8758 at 2013-07-03 10:56:50
你的目标带多大呢?

接近1000吧,你怎么看这个问题啊!
3楼2013-07-09 08:02:40
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Eva2009 at 2013-07-09 08:47:19
做个半巢式PCR试试吧,做RACE出现这种情况很正常啊

我做是巢式PCR,这是第二轮扩增结果,第一轮没有带!半巢式比巢式PCR好一些啊?换一个引物,是换特异性引物还是通用引物啊?
5楼2013-07-18 08:36:27
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