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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 5'race 扩不出来目的条带 求指教
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)

[求助] 5'race 扩不出来目的条带 求指教

各位同僚前辈好，我最近做RACE试验，3'做出来了好久了，但是5'端扩了好久都没有出来，不知道啥原因！引物也换了，做的巢式PCR，两轮！出来的带都是弥散的或者中间特别亮、两侧弥散！
电泳图，泳道1-5，23为全引物扩增，45为单引物扩增。
附件为引物信息。
请指教！5'race 扩不出来目的条带 求指教
2013.6.jpg
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  • 附件 1 : 引物信息.docx
    • 2013-07-02 10:30:00, 15.63 K

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1楼 2013-07-02 10:30:59
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zhouking8758

木虫 (正式写手)
你的目标带多大呢？
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2楼2013-07-03 10:56:50
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouking8758 at 2013-07-03 10:56:50
你的目标带多大呢？

接近1000吧，你怎么看这个问题啊！
赞一下 回复此楼
3楼2013-07-09 08:02:40
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Eva2009

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
4楼2013-07-09 08:47:19
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梦飞zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Eva2009 at 2013-07-09 08:47:19
做个半巢式PCR试试吧，做RACE出现这种情况很正常啊

我做是巢式PCR，这是第二轮扩增结果，第一轮没有带！半巢式比巢式PCR好一些啊？换一个引物，是换特异性引物还是通用引物啊？
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5楼2013-07-18 08:36:27
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