24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4533  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

鸡鸣不已

铜虫 (正式写手)


[求助] 蛋白质等电点沉淀之后怎么重新溶解

现在在做蛋白质纯化,想过阳离子交换柱,因为蛋白质稳定pH要>4.5,等电点预测在5.1左右,故选用pH4.6的乙酸-乙酸钠缓冲液,但加了之后就浑浊了,大侠们,我该怎么办
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marmot218

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以尝试加一些表活、去污剂之类的 或者低浓度的变性剂 对有些蛋白有稳定作用
9楼2013-07-03 09:17:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-02 18:52:58
鸡鸣不已: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢,我再看看 2013-07-03 14:33:48
是否精确测算过蛋白等电点?因为你的蛋白稳定要>4.5,用4.6的缓冲液去置换,蛋白会先经过5.1的等电点沉淀,然后继续加会稍许变清,但是因为距离等电点较近,所以不会变的很清,就是说不一定会完全溶解。楼主需要考虑一下精确测量蛋白的等电点,然后选择合适的pH缓冲液。另外,层析类型也需要考虑,是否一定要用阳离子交换?
2楼2013-07-02 11:03:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-02 18:53:04
鸡鸣不已: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢,我再看看 2013-07-03 14:34:01
我想问一下,你的蛋白是需要重新溶解,还是需要改进实验方法?

1. 如果是重新溶解,建议你变性溶解!选择尿素或者盐酸胍!
2.如果是改进实验方法,建议你先准确计算一下你的等电点,然后看看等电点是否很高?根据等电点做选择合适的离子柱!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
3楼2013-07-02 12:26:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marmot218

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-02 18:53:19
鸡鸣不已: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢,我再看看 2013-07-03 14:34:21
首先等电点要准确 然后为什么不能用阴离子交换呢 如果用阴离子交换 缓冲液的选择会增加很多
4楼2013-07-02 13:36:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 287求调剂 +10 Fnhc 2026-04-07 16/800 2026-04-08 10:07 by xingguangj
[考研] 283分求调剂 +14 试试看呗 2026-04-04 14/700 2026-04-08 07:03 by lijunpoly
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +12 努力奋斗112 2026-04-06 13/650 2026-04-07 23:49 by JourneyLucky
[考研] 368化学求调剂 +4 wwwwabcde 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:51 by wwwwabcde
[考研] 22408 318分求调剂 +4 勤奋的小笼包 2026-04-06 6/300 2026-04-07 15:05 by 纸鹤555
[考研] 328求调剂 +4 ghhh88888 2026-04-06 5/250 2026-04-07 14:45 by ghhh88888
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358求调剂 +10 cs0106 2026-04-05 12/600 2026-04-06 19:41 by 无际的草原
[考研] 第一志愿东南大学物理313,有科研竞赛获奖经历,希望物理复试调剂 +3 马内橙 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:32 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿211,化学学硕,310分,本科重点双非,求调剂 +13 努力奋斗112 2026-04-04 13/650 2026-04-06 07:13 by jj987
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:06 by imissbao
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 331求调剂 +3 niby 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:56 by 蓝云思雨
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 325求调剂 +4 春风不借意 2026-04-04 4/200 2026-04-04 14:46 by 湘农储能材料
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 311求调剂 +20 zchqwer 2026-04-01 22/1100 2026-04-03 22:09 by lglzsd
[考研] 考研调剂 +8 不爱喝饮料 2026-04-03 8/400 2026-04-03 16:40 by Mistake-J
[考研] 313求调剂 +3 ~微微凉~ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
信息提示
请填处理意见