24小时热门版块排行榜    

查看: 5030  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

鸡鸣不已

铜虫 (正式写手)


[求助] 蛋白质等电点沉淀之后怎么重新溶解

现在在做蛋白质纯化,想过阳离子交换柱,因为蛋白质稳定pH要>4.5,等电点预测在5.1左右,故选用pH4.6的乙酸-乙酸钠缓冲液,但加了之后就浑浊了,大侠们,我该怎么办
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marmot218

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以尝试加一些表活、去污剂之类的 或者低浓度的变性剂 对有些蛋白有稳定作用
9楼2013-07-03 09:17:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-02 18:52:58
鸡鸣不已: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢,我再看看 2013-07-03 14:33:48
是否精确测算过蛋白等电点?因为你的蛋白稳定要>4.5,用4.6的缓冲液去置换,蛋白会先经过5.1的等电点沉淀,然后继续加会稍许变清,但是因为距离等电点较近,所以不会变的很清,就是说不一定会完全溶解。楼主需要考虑一下精确测量蛋白的等电点,然后选择合适的pH缓冲液。另外,层析类型也需要考虑,是否一定要用阳离子交换?
2楼2013-07-02 11:03:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-02 18:53:04
鸡鸣不已: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢,我再看看 2013-07-03 14:34:01
我想问一下,你的蛋白是需要重新溶解,还是需要改进实验方法?

1. 如果是重新溶解,建议你变性溶解!选择尿素或者盐酸胍!
2.如果是改进实验方法,建议你先准确计算一下你的等电点,然后看看等电点是否很高?根据等电点做选择合适的离子柱!
长得比我英俊的,没我有才华!有才华的,没我长得俊!
3楼2013-07-02 12:26:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

marmot218

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-02 18:53:19
鸡鸣不已: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢,我再看看 2013-07-03 14:34:21
首先等电点要准确 然后为什么不能用阴离子交换呢 如果用阴离子交换 缓冲液的选择会增加很多
4楼2013-07-02 13:36:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:32 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:26 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:21 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:13 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:10 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 5/250 2026-11-11 01:04 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 21:02 by Z7qfCsdIiD1T
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:56 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 4/200 2026-11-10 20:51 by Z7qfCsdIiD1T
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:45 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-10 20:18 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 19:39 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见