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蛋白质等电点沉淀之后怎么重新溶解
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现在在做蛋白质纯化，想过阳离子交换柱，因为蛋白质稳定pH要>4.5，等电点预测在5.1左右，故选用pH4.6的乙酸-乙酸钠缓冲液，但加了之后就浑浊了，大侠们，我该怎么办 |
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5楼2013-07-02 17:18:53
wolfman840
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-02 18:52:58
鸡鸣不已: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢，我再看看 2013-07-03 14:33:48
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| 是否精确测算过蛋白等电点？因为你的蛋白稳定要＞4.5，用4.6的缓冲液去置换，蛋白会先经过5.1的等电点沉淀，然后继续加会稍许变清，但是因为距离等电点较近，所以不会变的很清，就是说不一定会完全溶解。楼主需要考虑一下精确测量蛋白的等电点，然后选择合适的pH缓冲液。另外，层析类型也需要考虑，是否一定要用阳离子交换？ |
2楼2013-07-02 11:03:11
3楼2013-07-02 12:26:39
marmot218
木虫 (著名写手)
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4楼2013-07-02 13:36:40
50