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hraikeyan

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达问题

给位大侠,我之前一直在做基因文库,好不容易从文库中筛到了具有我要的酶活性的克隆子。但是通过测序,发现并没有相关的酶的基因。都是一些膜蛋白,还有几个是没有报道的未知蛋白,可是通过活性检测,明明是有活性的。
我的做法就是,将测序结果分析阅读框,挑了几个较大的阅读框(2000bp-500bp)都分别设计引物克隆表达,但是都做了4个了,都没有表达出蛋白,是一点都没有啊。请问这是怎么回事?是不是不是所有的完整阅读框都能表达蛋白,只是有功能性的蛋白可以表达?
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nothing isimpossible
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