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kyh416

铁虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白前面有一个his-tag和sumo-tag,想去掉sumo-tag，只留下一个his-tag，该怎么做 已有1人参与

我的蛋白，最前面是一个his-tag，然后连着sumo，再来才是我的蛋白

我现在只想要接个his-tag就好，去掉sumo

请问要怎么做呢

本人是菜鸟

求各位指点下，最好能详细点说明，不胜感激

[ Last edited by kyh416 on 2013-6-15 at 21:35 ]
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1楼 2013-06-15 21:31:28
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yhbletter

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-06-16 16:05:03
用酶切的方法切掉你的个his-tag+sumo+目的蛋白，
然后设计一对引物，上游引物直接把his-tag加上，也就二三十个碱基，下游引物用你目的蛋白下游引物，上下游引物都加上上步中的酶切位点，然后PCR扩增得到his-tag+目的蛋白。这样一个序列
用双酶切和第一步的载体连接就可以了
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4楼2013-06-16 13:40:03
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kyh416(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-16 10:42:16
楼主说的是质粒? 那可以用mutagenesis的办法
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2楼2013-06-16 00:34:21
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kyh416

铁虫 (初入文坛)
是质粒，具体怎么做mutagenesis还请高人指点
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3楼2013-06-16 13:19:00
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gj0000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

用sumo蛋白酶切一下，将sumo切掉
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5楼2014-07-31 11:21:11
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