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fy657431

铁虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱测浓度不出峰 咋办啊 无助中??? 已有1人参与

我是个菜鸟啊,我用高效液相色谱测水溶液中甘草酸浓度。用安捷伦C18柱子,在25度,进样量20微升,流动相为 乙腈:水=50:50(v/v),流速分别为0.1,0.2,0.4(mg/ml) ,甘草酸大概浓度0.5mg/ml, 50分钟竟然不出峰,迷茫痛苦啊  !求高手指点一二   
说明:甘草酸在水中溶解度较小。
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你确定氘灯亮了?检测器波长选择正确?
4楼2013-05-29 16:56:38
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
在252nm测试一下试试,流动相加点甲酸,这个浓度应该可以出峰了
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
5楼2013-05-29 17:09:32
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damojinghong

至尊木虫 (知名作家)

娴 囩 嘢 鹤 唻 厾 呒 琮

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-05-31 10:24:27
样品浓度不算小了 应该不是样品浓度问题
流动相是50:50,这个酸极性大,应该较早出峰啊。
这个比例可以不变建议水相偏酸些,流速1先试试,出峰再慢慢优化
一定要注意波长
8楼2013-05-29 21:42:15
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普通回帖

1856029357

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
fy657431: 金币+1, 有帮助 2013-05-29 16:28:10
进样量或者浓度低了。还有主要你的检测条件是不是对的。感觉水的比例有点高啊。建议把条件好好查一下。
乱世出英雄,盛世皆狗熊
2楼2013-05-29 08:11:32
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腊月荔枝

木虫 (小有名气)

金虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fy657431: 金币+1 2013-05-29 16:28:32
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-05-31 10:23:52
一:柱温可以稍微高一点呀;
二;增加有机相的比例,既然甘草酸在水中溶解度不好;试着用梯度洗脱看看;
三:可以用缓冲盐吗?
3楼2013-05-29 08:26:51
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swallow13

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

6楼2013-05-29 17:14:42
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流沙二十

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个色谱条件一定先要好好查一查,波长,流速,柱温,流动相都会有影响的,建议楼主先确定检测波长,非常重要,不然紫外没有吸收,怎么可能出峰呢,然后就是你的样品浓度了,如果太稀,是可能不出峰的
安放好自己的心,找到自己喜欢的生活
7楼2013-05-29 21:27:47
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wh03wdd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先用紫外扫一下最大吸收波长在什么位置
9楼2013-05-31 10:19:41
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kangkang388

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

加入些酸,如甲酸、乙酸或磷酸,甘草酸检测波长最好在250nm左右,肯定能出峰
10楼2013-08-08 08:35:21
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