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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 高效液相色谱测浓度不出峰 咋办啊 无助中？？？
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fy657431

铁虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱测浓度不出峰 咋办啊 无助中？？？ 已有1人参与

我是个菜鸟啊，我用高效液相色谱测水溶液中甘草酸浓度。用安捷伦C18柱子，在25度，进样量20微升，流动相为 乙腈：水=50:50（v/v），流速分别为0.1,0.2,0.4(mg/ml) ，甘草酸大概浓度0.5mg/ml， 50分钟竟然不出峰，迷茫痛苦啊  ！求高手指点一二   
说明：甘草酸在水中溶解度较小。
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1楼 2013-05-28 19:28:17
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定氘灯亮了？检测器波长选择正确？
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4楼2013-05-29 16:56:38
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在252nm测试一下试试，流动相加点甲酸，这个浓度应该可以出峰了
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中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
5楼2013-05-29 17:09:32
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damojinghong

至尊木虫 (知名作家)

娴 囩 嘢 鹤 唻 厾 呒 琮

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-05-31 10:24:27
样品浓度不算小了 应该不是样品浓度问题
流动相是50:50，这个酸极性大，应该较早出峰啊。
这个比例可以不变建议水相偏酸些，流速1先试试，出峰再慢慢优化
一定要注意波长
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8楼2013-05-29 21:42:15
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普通回帖

1856029357

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fy657431: 金币+1, ★有帮助 2013-05-29 16:28:10
进样量或者浓度低了。还有主要你的检测条件是不是对的。感觉水的比例有点高啊。建议把条件好好查一下。
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乱世出英雄，盛世皆狗熊
2楼2013-05-29 08:11:32
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腊月荔枝

木虫 (小有名气)

金虫

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fy657431: 金币+1 2013-05-29 16:28:32
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2013-05-31 10:23:52
一：柱温可以稍微高一点呀；
二；增加有机相的比例，既然甘草酸在水中溶解度不好；试着用梯度洗脱看看；
三：可以用缓冲盐吗？
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3楼2013-05-29 08:26:51
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swallow13

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
6楼2013-05-29 17:14:42
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流沙二十

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个色谱条件一定先要好好查一查，波长，流速，柱温，流动相都会有影响的，建议楼主先确定检测波长，非常重要，不然紫外没有吸收，怎么可能出峰呢，然后就是你的样品浓度了，如果太稀，是可能不出峰的
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安放好自己的心，找到自己喜欢的生活
7楼2013-05-29 21:27:47
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wh03wdd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先用紫外扫一下最大吸收波长在什么位置
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9楼2013-05-31 10:19:41
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kangkang388

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

加入些酸，如甲酸、乙酸或磷酸，甘草酸检测波长最好在250nm左右，肯定能出峰
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10楼2013-08-08 08:35:21
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