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yanfang2012

木虫 (著名写手)

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[交流] 核酸的HPLC有人做过吗

要测酶活性，底物和产物是RNA,用HPLC测产物的量，不知道有哪些注意事项，有做过的虫子分享一下经验吗

[ 来自小组生物医药家族 ]

[ Last edited by yanfang2012 on 2013-5-26 at 09:34 ]

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1楼 2013-05-25 20:54:18

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

TrickyVick

金虫 (小有名气)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yanfang2012: 金币+2 2013-06-04 08:54:21

引用回帖:

8楼: Originally posted by yanfang2012 at 2013-05-27 14:31:27
nano drop 不适合我做的东西...

那就不好弄了啊，反应没啥副反应的话把底物过一遍做个control，再把反应后的过一遍看看多出来哪个。有产物更好，做positive control。从retention time上看是哪个物质，从峰强度算相对amount。另外一些rule of thumb，一般长一点的核酸后面出来，短一点的前面出。

另外你不管怎么样都要跑胶吧？不然不好证明你RNA没有degrade，这个要小心的。DEPC water，口罩，眼镜，头套，专门的实验服，杀RNA酶的清洁剂啥的。

严格一点的paper还是会要你跑胶或做MS或者测序产物的