24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2139  |  回复: 8
本帖产生 1 个 MicEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

anruoka

木虫 (正式写手)

[求助] 重组牛胰蛋白酶在毕赤酵母中的表达 已有1人参与

我们做的是重组牛胰蛋白酶,用的是毕赤酵母GS115
表达量比较低,western blot才能看见
怎么办呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

我是一只好虫子
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wujunyi354

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

尝试下调节诱导后PH
5楼2013-12-06 13:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

heroxuning

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问是什么载体的?如果是pPIC9K的,可以使用遗传霉素G418高抗筛选高拷贝,我们一般使用1.0,2.0,3.0,4.0mg/ml浓度
如果是pPICZaA系列,可以考虑 用高浓度Zecion梯度平板筛选高拷贝,
理论上拷贝数多,表达量会高一点,因蛋白而异
2楼2013-05-25 20:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anruoka

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by heroxuning at 2013-05-25 20:24:40
请问是什么载体的?如果是pPIC9K的,可以使用遗传霉素G418高抗筛选高拷贝,我们一般使用1.0,2.0,3.0,4.0mg/ml浓度
如果是pPICZaA系列,可以考虑 用高浓度Zecion梯度平板筛选高拷贝,
理论上拷贝数多,表达量会高一 ...

pPICZaA、B、C有什么区别
Zeocin浓度怎么选择
我是一只好虫子
3楼2013-05-25 21:25:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heroxuning

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by anruoka at 2013-05-25 21:25:41
pPICZaA、B、C有什么区别
Zeocin浓度怎么选择...

没什么区别,都是一系列的,中间一些限制性内切酶酶切位点不一样,我们实验室倒梯度平板,先到10mg/ml Zeocin 平板斜面,然后待其凝固,再在高抗斜面上倒无抗固体培养基,使平板保持水平。这样抗生素分子扩散就形成从0---10mg/ml浓度渐变的平板了,在其上涂转化平板上用水冲洗的菌液,长3-4day即可,
4楼2013-05-25 21:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工(085600)296求调剂 +23 稻妻小编 2026-03-26 23/1150 2026-03-30 17:49 by oooqiao
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 289求调剂 +15 新时代材料 2026-03-27 15/750 2026-03-30 17:12 by 晴空210210
[考研] 290求调剂 +3 dfffsar 2026-03-29 3/150 2026-03-29 22:38 by 毛毛毛阿莫2
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分,求调剂 +5 0857求调剂. 2026-03-24 6/300 2026-03-28 22:04 by zhq0425
[考研] 学硕274求调剂 +9 Li李鱼 2026-03-26 9/450 2026-03-28 21:42 by bymhappy
[考研] 压国家一区线,求导师收留,有恩必谢! +7 迷人的哈哈 2026-03-28 7/350 2026-03-28 16:47 by 催化大白
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 12:04 by 王保杰33
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
[考研] 材料求调剂 +5 .m.. 2026-03-25 5/250 2026-03-27 11:08 by 不吃魚的貓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
信息提示
请填处理意见