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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS聚丙烯酰胺电泳的电压选择
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)

[求助] SDS聚丙烯酰胺电泳的电压选择

我的蛋白质在20-50kda之间，用的是12%的胶，应该用多大的电压，跑多长时间才合适啊？
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1楼2013-05-23 11:07:50
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muyanshuang

木虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 应助指数-1, 谢谢参与，不过回帖更倾向于交流，而不是应助：楼主问电压 2013-05-24 07:51:58
一般为20mA，60min。
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2楼2013-05-23 12:22:04
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢分享经验 2013-05-24 07:52:12
SDS-PAGE的电压选择！浓缩胶的电压是60V，跑到分离胶与浓缩胶分界线下面一点！
改为100V~120V之间的电压跑到距离最底下1cm！时间的长短在于你分离胶的长短！这个时间是没有办法确定的！就像15cm和20cm的分离胶电泳时间长短是不一样的！
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长得比我英俊的，没我有才华！有才华的，没我长得俊！
3楼2013-05-23 12:30:32
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-23 12:30:32
SDS-PAGE的电压选择！浓缩胶的电压是60V，跑到分离胶与浓缩胶分界线下面一点！
改为100V~120V之间的电压跑到距离最底下1cm！时间的长短在于你分离胶的长短！这个时间是没有办法确定的！就像15cm和20cm的分离胶电泳 ...

跑到距离最底下1cm？可是书上写的是到溴酚蓝到达胶的最底部。
还有一个问题，就是溴酚蓝在12%的胶里相当于多大的蛋白啊？
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4楼2013-05-24 10:52:44
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不转录的DNA

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 颖颖贝 at 2013-05-24 10:52:44
跑到距离最底下1cm？可是书上写的是到溴酚蓝到达胶的最底部。
还有一个问题，就是溴酚蓝在12%的胶里相当于多大的蛋白啊？...

跑到距离最底下1cm 这只是经验之谈！相信你选择的，单纯的书本知识在现在已经不能说明问题了！书本的知识只是过去得到肯定的学识！最新的理论应该是在科学的paper上！（好吧！我又扯远了！）

溴酚蓝的分子量是670.02，也就是相当于670.02Da！所以你懂了吧！至于相对分子量和道尔顿之间的关系我就不解释了！你可以搜索一下我以给别人的解释！你也可以百度一下！



好吧！就这么多吧！希望对你有用！
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长得比我英俊的，没我有才华！有才华的，没我长得俊！
5楼2013-05-24 11:21:17
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 不转录的DNA at 2013-05-24 11:21:17
跑到距离最底下1cm 这只是经验之谈！相信你选择的，单纯的书本知识在现在已经不能说明问题了！书本的知识只是过去得到肯定的学识！最新的理论应该是在科学的paper上！（好吧！我又扯远了！）

溴酚 ...

哦，这样啊。 谢谢啦！
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6楼2013-05-27 16:20:13
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treetreew

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我都90 150
放心跑,着急的话200跑到底
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7楼2013-06-08 09:18:08
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